盒式诱变的简介

　　盒式诱变(cassette mutagenesis)是一种定点诱变技术，其方法是利用一段人工合成的具有突变序列的双链寡核苷酸片段，取代野生型基因中相应序列。这种诱变的双链寡核苷酸片段是由两条人工合成的寡核苷酸链组成的，当它们退火时，会按照设计要求产生出克隆需要的粘性末端。这些合成的寡核苷酸片段就好像不同的盒式录音磁带，可随时插入到已制备好的载体分子(“录音机”)上，便可以获得数量众多的突变体，故称为盒式诱变。该方法的优点是简单易行，突变效率高。

　　盒式诱变包括简单的盒式取代诱变和混合寡核苷酸诱变两种方式。简单的盒式取代诱变是通过限制性内切酶切除特定的双链DNA片段，再与含有突变的单一序列双链寡核苷酸连接，得到取代突变，是一种定点诱变。若用于取代的是含有随机突变的混合双链寡核苷酸，则可在限定区域内引入大量的随机突变 [1] 。