LSM成像原理
成像原理
传统荧光显微镜一个难以克服的缺点是，来自焦平面以外的荧光也被物镜所收集，光学分辨率大大降低 。LSCM脱离了传统的场光源和局部平面成像模式采用激光为光源，在传统荧光显微镜成像的基础上，附加了激光扫描装置和共轭聚焦装置。
激光束经照明针孔，经由分光镜反射至物镜，并聚焦于样品上，对样品焦平面上每一点进行扫描,发射的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜，通过检测针孔时先聚焦，聚焦后的光被光电倍增管(PMT)探测收集， 在这个光路中，只有在焦平面的光才能穿过检测针孔，焦平面以外区域射来的光线在探测小孔平面是离焦的，不能通过小孔。
焦平面限制在约1微米大小的受限体积内。通过沿着显微镜的光学（z）轴获取一系列切片，可以对相对厚的标本进行成像。
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