动物细胞培养中动物血清的相关介绍
1.储存
血清的保质期是5年,储存温度小于-10℃。
血清长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。
2.解冻
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能。血清热灭活也会导致沉淀的形成。
3.浑浊和沉淀
所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果有必要,可以通过400g离心1min离心去除。
4.热灭活
通常不使用热灭活血清,除非某些特定的细胞系特别需要。热灭活通常是不必要的。热灭活会降低或破坏血清中的生长因子,影响某些细胞的生长。
热灭活最初是为了灭活补体及支原体。目前,如果血清中出现支原体,可以通过过滤去除。而去除补体通常是不必要的,除非是在准备或检测病毒或细胞毒性试验时。有研究显示,血清37℃孵育就可以灭活血清中热不稳定的补体成分。只有很少一部分细胞在这种灭活血清中生长得更好。如胚胎干细胞和许多昆虫细胞。
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