血管紧张素转化酶的注意事项

　　1、三硝基苯磺酸钠（INBS）显色法：

　　（1）标本在室温或冰箱存放1周，酶活力无明显变化，-15℃保存3周酶活性稳定。

　　（2）胆红素对ACE有明显抑制作用，故重度黄疸可使测定结果偏低。EDTA是ACE的强抑制剂，NaCl和Na2SO4对ACE有明显的活化作用，溶血、脂血对结果无影响。

　　（3）本法与紫外分光光度法酶活力单位一致，但其测得值为紫外法的9倍。

　　2、酶偶联法：

　　（1）当底物pH 8.0，GGCN 1.0mmol/L，GGT6.7ku/L时，ACE活性与吸光度值有良好线性。线性范围大，即使ACE在1500U/L，不用稀释也可获得理想结果。

　　（2）GGCN浓度选择：本反应体系中GGCN既是测定酶ACE的受体，又是指示酶GGT的供体。以1.0mmol/L的GGCN最理想，在此浓度下GGCN与吸光度保持良好的线性。

　　（3）GGT对测定的影响：本反应利用GGT将双甘肽与GGCN偶联，生成黄色的3-羧基-4-硝基苯胺，其加入量可直接影响测定结果。GGT高浓度可使底物过度消耗，使吸光度偏离曲线；低浓度GGT又使吸光度偏低，灵敏度不高。每次加入0.335 U GGT，可获得理想吸光度与线性。在此浓度下，酶基质液的空白管吸光度<0.1A。