概述Maxam-Gilbert的操作方法

　　由于凝胶电泳分辨率的限制，必须将DNA分子用限制性内切酶切割成数百个核苷酸长的片段，从这些片段的序列组建成整个DNA分子的序列。为此必须先建立DNA的限制性内切酶图谱。

　　在进行酶图分析时，通常先测定切点较少的酶的位点，然后再测定切点较多的酶的位点。内切酶切点出现的频率一般可根据内切酶识别序列的核苷酸长短来估计，即大约每4n个碱基有一个内切酶切点，n为该种内切酶识别序列的核苷酸数目，如识别6核苷酸序列的内切酶的切点出现频率大约是每4，096(46)个碱基有一个 [2] 。

　　酶图分析的简便方法是将DNA分子用限制性内切酶切断，用琼脂糖凝胶或聚丙烯酞胺凝胶电泳，将产生的DNA片段分开，根据这些片段的数目和大小，可以推定该种内切酶的切点数目及位置。

　　对于切点较多的内切酶位点，可将这种内切酶酶解DNA后产生的片段，与该种内切酶和已知切点位置的切点较少的内切酶混合酶解后产生的片段比较，从被已知切点位置的内切酶切断而消失了的片段和新产生的片段的大小来推定该种内切酶的位点。在建立了初步的限制性内切酶图谱、开始序列分析后，随着序列结果的积累，还会发现更多的在进一步的序列分析中有用的内切酶切点。