水中肠道致病菌(沙门氏菌属和志贺氏菌属)检验方法二
3.2 常规检验方法:
3.2.1 增菌培养:快速检验法中的直接增菌法和浓缩增菌法相同,其中志贺氏菌的增菌时间可以为16-18小时。
3.2.2 平板分离:取上述经增菌的沙门氏菌、志贺氏菌培养液,用接种环化线接种改良SS选择琼脂平板,置37℃培养箱中培养24小时。(如使用其它选择培养基时,请注意对宋内氏痢疾杆菌是否良好,还是不生长或生长很差)。
3.2..3 挑 选菌落接种双糖管:每个平板挑取5个以上可疑肠道病原菌菌落,接种于双糖铁或三糖铁试管培养基中(将克氏双糖铁干燥培养基加水煮沸溶解后分装于塑帽试管 中,3ml,高压蒸汽灭菌或水浴100℃15分钟后放成高层斜面,凝固后即成)。置37℃培养箱中培养18-24小时。
附:沙门氏菌属和志贺菌属在改良SS选择琼脂平板上的菌落特征:
沙门氏菌属,菌落呈无色透明或半透明或中间有黑心,直径为1-3毫米(培养时间长时,有的菌落中心略呈微粉色,但与红色的大肠菌菌落完全不同)。
志贺氏菌属,菌落呈无色透明或半透明(宋氏痢疾杆菌的菌落中心有时略呈浅色),直径1-3毫米。
3.2..4 生化反应及血清学检验:
沙门氏菌属:在双糖铁或三糖铁培养基上,底层变黄(分解葡萄糖产酸),产气或不产气(如伤寒沙门氏菌不产气),一般产H2S;斜面呈红色(不分解乳糖)。用沙门氏菌多价血清或单价抗血清进行凝集试验,根据凝集与否判断为阳性或阴性。
志贺氏菌属:在双糖铁或三糖铁培养基上,底层变黄(分解葡萄糖产酸),不产气,无动力,不产H2S;斜面呈红色(不分解乳糖)。用志贺氏菌多价血清或单价血清进行凝集试验,根据凝集与否判断为阳性或阴性。
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