液相色谱柱选择的简单思路
一、液相色谱柱选择的简单思路
1.确定应用程序是否要求分离程度高、分析时间短、灵敏度高、柱寿命长、实验成本低等。
2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质如化学结构,溶解度,稳定性等。
3.选择合适的色谱柱,了解色谱填料的理化性质。
二、液相色谱柱选择的条件
填料基质
硅胶基质：纯度高，成本低，强度大，化学改性容易，但pH范围有限大多数硅基填料在ph2-8之间稳定，但经过特殊改性的硅键合相在ph1.5-10之间稳定。
聚合物基体：pH值范围宽，温度稳定高温可达80度以上机械强度小。
颗粒外形
现代高效液相色谱填料大多是球形颗粒，但有时是不规则颗粒。球形颗粒在使用高粘度活性相时会提供更低的柱压力、更高的柱效率和稳定性以及更长的柱寿命；不规则颗粒具有较大的比表面积和相对较低的价格。
颗粒粒径
粒径越小，柱效越高，分辨率越高，但同时，柱压降也越大当选择1.5-3或M填料以解决一些复杂样品时，UPLC可使用1.5或M填充剂，而另10％M或更大的填料可用作半制备或制备的柱。
含碳量
碳含量是指硅胶表面结合相的比例，与比表面积和结合覆盖率有关。采用高碳含量提高塔的容量、分辨率和分析时间，需要分离程度高、碳含量分析时间低、选择性不同的复杂样品，用于快速分析需要高含水率活性相条件的简单样品和样品。通常，C18的碳含量在7%到19%之间。
孔径和比表面积
HPLC吸附介质是多孔颗粒，并且大部分反应表面在孔中因此分子必须进入孔隙才能被吸附和分离。
孔径和比表面积是两个相辅相成的概念孔径小，比表面积大，反之亦然比表面积大，样品与键合相的反应增加，储存分离程度增加，负载量增加，复合组分增加，比表面积小，平衡时间快，梯度分析合适。
孔容和机械强度
孔容，也称为“孔隙体积”指每单位粒子的空隙体积的大小它能很好地反映填料的机械强度大孔隙体积填料的机械强度略弱于小孔隙体积填料孔径小于等于1.5ml/g的填料主要用于高效液相色谱分离，孔径大于1.5ml/g的填料主要用于大小排阻色谱和低压色谱。
封端封端
由于与暴露硅酮基团的相互作用，封端可以减少极性碱性化合物的尾随峰。非密封相的选择性不同于封端相，特别是极性样品。
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