关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

高效液相色谱仪中色谱法的计算公式是什么?

2020.1.06

在定量测定中可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法当用下列方法或内标法测定杂质总量时应使用峰面积法。

面积归一化法

用无校正因子的峰面积归一化法测定供试品(或经导数处理的供试品)中杂质和杂质的总量限值。计算每个杂质峰的面积和其总和,并计算总峰值面积的百分比。但溶剂峰不包括在内色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间来确定。除非另有规定,否则可以是该品种下主要成分保留时间的倍数。

主成分自身对照法

当杂质峰面积和组分峰面积不同时,采用主成分的自控制方法。测定前,按各品种规定的杂质限值,将供试品稀释至一定浓度的溶液作为对照溶液,进样,调整检测器的灵敏度或进样量。使主成分谱峰面积在控制溶液中能满足精确测量的要求。然后应采取试验物品溶液,进样和记录时间,主要成分的保留时间应为主要成分保留时间的倍数,除非另有规定..杂质限值根据受试溶液中杂质的峰面积和和和对照溶液中主要成分的峰面积计算。

内标法

测定供试品中杂质的总量限度

使用没有校正因子的峰面积法取供试品,按各品种规定的方法制备不含内标物的供试品溶液,注入仪器记录色谱图一然后用内标物制备供试品溶液,在相同条件下进样,记录色谱图二记录时间应为品种内标准峰保留时间的倍数,色谱图内标峰高应大于记录仪全刻度的30%以上。否则,应调整样品注入量或检测器灵敏度。

如果色谱图I中没有与色谱图II中内标峰保留时间相同的杂质峰则色谱图II中杂质峰面积之和应小于内标峰面积(溶剂峰除外)如果色谱图II中的色谱图I与内标物的色谱峰保留时间相同,则色谱II内标物的峰面积应从色谱图中的该杂质峰面积中减去,该色谱图I是内标物质峰的校正面积;色谱II中每个杂质峰的总面积加上色谱图中杂质峰面积,即,每个杂质峰的校正总面积,每个杂质峰的校正总面积应小于内标物质峰的校正面积。

加入校正因子测定供试品中某一杂质或主成分的含量

根据各类型的要求,对控制标准和内部标准物质进行准确称重(量)以配制溶液,准确称重各溶液,配制测定校正因子的控制溶液,取一定量的进样装置,记录色谱图,测量参比物质和内标准物质的峰面积或峰高,计算校正系数如下:

校正因子f=-ar/mr其中as为内标物的峰面积或峰高,ar为对照物的峰面积或峰高,ms为内标物的量,mr为对照物的量。然后取各品种内含有内标物的试液,注入仪器,记录色谱图,测定供试品(或其杂质)的峰面积或峰高度和内标物的峰高度,并按照以下公式计算含量:AX含量(MX)=F或AS/MS,其中AX是供试品(或其杂质)的峰面积或峰高度;MX是供试品(或其杂质)的量。f,as和ms的意思是一样的。

当使用同一内部标准物质溶液制备用于测定校正因子的对照溶液和含有内部标准物质的样品溶液时,不需要精确地称重(测量)内部标准物质溶液的制备。


推荐
关闭