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蛋白冻干技术和冻干后的影响

2020.5.11

第一:什么是蛋白?

蛋白又名鸡子白,异名鸡卵白(《别录》)、鸡子清(《食疗本草》)。为雉科动物家鸡的蛋白,是常见的食品。营养优良、润肺利咽、清热解毒。

第二:蛋白为什么要冻干?

蛋白质对热敏感,冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来,提高蛋白的稳定性并延长保存时间,同时降低运费。

第三:冻干对蛋白会有哪些影响?

冻干有可能会造成蛋白的活性部分损失,聚集和其它变性问题。但可以通过添加保护剂(稳定剂,添加剂,辅料)和控制冻干的各种条件来尽可能降低这些负面的影响。

第四:冻干对蛋白前为什么向蛋白溶液中加保护剂?

保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。

第五:一般冻干保护剂有哪几种?

常用的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。

本公司常用的保护剂:通常加8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。

海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集。

甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。有文献报道甘露醇可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。

第六:怎样复溶蛋白干粉?怎样复溶蛋白干粉?

建议使用过滤后的无菌纯化水作为复溶剂。添加纯化水至推荐的体积,轻轻摇晃西林瓶,使蛋白溶解完全均匀。

注意事项:切忌剧烈摇晃。轻轻摇晃西林瓶,使蛋白溶解完全均匀。

PBS或者其它缓冲液也可以用来做复溶剂,因为PBS中的盐可以在体积微量的情况下忽略不计。如果可能,可以做一下两种复溶剂的效果比较。

第七:为什么有的蛋白带标签?

使用蛋白标签的最初目的用于蛋白纯化。此外,在某些试验中可以用于检测蛋白。Fc标签有稳定融合蛋白的作用。 Fc可以自主的形成二聚体,因此他可以帮助融合蛋白,特别是受体,形成有活性的二聚的形式。

第八:标签会影响蛋白活性吗?

具体情况具体分析。对于某些应用,小的标签,如组氨酸标签,可能对蛋白活性的影响比较小,因此也无需将其去除。如果担心标签是不是会对蛋白活性有影响,可以咨询客服进行查询。另外,有些蛋白标签是可以通过酶切去除的。


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