Biochrom30+氨基酸分析仪检测红鱱鱼中水解氨基酸
摘要：
以红鱱鱼为原料，使用Biochrom30+全自动氨基酸自动分析仪对其肌肉的氨基酸组成进行分析。结果表明红鱱鱼肌肉中氨基酸总量的质量百分比为16558.3mg/100g，必需氨基酸(不含色氨酸)占氨基酸总量的39.78%，鲜味氨基酸占氨基酸总量的39.09%。
样品前处理
一、所用试剂
浓盐酸，浓度≥36%,优级纯
6mol/L 盐酸：取500mL 盐酸加水稀释至1000mL,混匀。
水：去离子水
苯酚：须重蒸
17种氨基酸标准品
二、前处理设备
分析天平:感量分别为 0.0001g和0.00001g。
水解管:耐压螺盖玻璃试管,体积为25mL
匀浆机。
无油真空泵
干浴水解浓缩仪
移液管
0.22um滤膜
三、样品制备
（参考国标GB 5009.124-2016）原料鱼手工去除鱼鳞、鱼皮、鱼刺和内脏，采肉后清洗、沥干，在匀浆机中打成肉糜，于-18℃冰箱中冷冻保存，分析时取出解冻后使用
四、试样水解
称取含蛋白7.5-25mg的试样，加入水解管中，加入15mL
6mol/L盐酸，继续向水解管内加入苯酚3滴~4滴。冷冻3min~5min,接到真空泵的抽气管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮气,重复抽真空-充入氮气3次后,在充氮气状态下拧紧螺盖。
将水解管放入干浴水解浓缩仪中，110°C水解22-24h，冷却、混匀、开管、转移并定容到50ml容量瓶中，用移液管取适量样液，在干浴水解浓缩仪中50°C吹干，必要时加入少许水，重复吹干1-2次，加入3-5mL
PH2.2的稀释上机用柠檬酸钠缓冲液溶解,振荡混匀后,吸取溶液通过0.22μm 滤膜后,转移至仪器进样瓶,为样品测定液,供仪器测定用。
分析方法描述（Biochrom 30+）
氨基酸分析仪分析方法参数:
色谱柱：Biochrom Na型阳离子交换树脂柱，4.6´20cm
分离程序：
| NO. | Time | Temp | Buffer | Pump | Nin | Rec | Commands |
| 1 | 01:00 | 48 | 1 | 35.0ml/h | ON | OFF | |
| 2 | 00:00 | 48 | 1 | 35.0ml/h | ON | OFF | Reset |
| 3 | 01:00 | 48 | 1 | 35.0ml/h | ON | OFF | Load |
| 4 | 06:40 | 48 | 1 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 5 | 13:00 | 52 | 2 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 6 | 01:00 | 52 | 5 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 7 | 16:00 | 95 | 5 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 8 | 04:00 | 95 | 6 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 9 | 04:00 | 95 | 1 | 35.0ml/h | ON | ON | |
| 10 | 09:00 | 48 | 1 | 43.0ml/h | OFF | OFF | |
| 11 | 02:00 | 48 | 1 | 35.0ml/h | ON | OFF | |
| End |
（1）运行时间：经分析时间+再生时间 57min
（2）反应单元温度：135°C。
（3）检测波长：570nm、440nm同时检测。
样品中氨基酸含量的计算
（1）计算: ci = cs /As ×Ai……………………
ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);
Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;
As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;
cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL)。
（2）计算: Xi = (ci ×F ×V ×M)/ (m ×109) ×100 ……………………
Xi ———试样中氨 基酸i的含量,单位为克每百克(g/100g)
ci ———试样测定液中氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);
F ———稀释倍数;
V ———试样水解液转移定容的体积,单位为毫升(mL);
M ———氨基酸i的摩尔质量,单位为克每摩尔(g/mol);
m ———称样量,单位为克(g);
10———将试样含量由纳克(ng)折算成克(g)的系数; 100 ———换算系数。
附、红鱱鱼分析图谱及做样结果
