怎样确定ELISA样品的稀释倍数
ELISA样品的稀释倍数确定方法：
首先你要明确你要测的样品的表达情况,如果低的话那你就得可以先用一两个孔,把你的样品原液稀释为一倍,五倍,做个预实验不用去测荧光表达,在加完终止液后直接观察颜色加好,然后确定你样品检测时的浓度.如果样品中要检测物质的表达较高,那么预实验室时可以适当的多稀释一下,五倍,十倍,十五倍,最多二十就差不多了.不过呢,在最终确定浓度时并不一定就是以上西式的浓度,可以去他们之间的数值的.
ELISA体系是之前实验人员建立的，标准曲线采用软件进行四参数拟合，举例如图。
又想了想出现上述情况可能的原因：
1、样品稀释
2、从低浓度到高浓度加样，不换枪头
3、标准曲线的形状。落在高吸光值区间，稍一点偏差对结果影响就很大。因此在稀释倍数准确的情况下，落在标准曲线变化急剧区域数据更准确。即吸光值小的部分结果准确。
1、2现在基本可以排除。这两次进行了自认为非常充分的稀释过程。之前加样也是低浓度到高浓度不换枪头。所以，3的可能性比较大。
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