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血细胞分析仪的选择技巧

2018.8.18

自七十年代出现第一代血细胞分析仪以来,随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展,现代医疗器械公司生产的细胞仪已今非昔比,制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。
       流式细胞仪生产厂商推出各种不同型号的流式细胞仪来满足用户的不同需要。现生产流式细胞的厂商全球至少有六家,各厂商产品又有不同的系列,各具特点。如何从众多的型号中挑选出最适合自己的机型,我们还需从分析应用出发,评估自己的需求来决定什么样的流式细胞仪最具性价比、最适合自己。
⑴、DNA倍体分析
DNA分析是流式细胞仪最初且是现在应用最广检测项目。由于恶性细胞DNA含量通常与正常细胞不同,存在异倍体细胞,所以现有很研究评价异倍体细胞与肿瘤恶性度及其预后的关系。DNA含量检测还可提供细胞周期方面的信息,这在细胞生物学中运用很广泛。特别地,它可表示出细胞毒性药物对细胞作用过程。这些DNA检测还可与细胞表面标志物标记同时进行,这样在细胞混合培养中,可通常追踪表达特异标志物的细胞显示其生长周期情况。所有方法都是基于染料能与核酸起特异的化学反应并发射出荧光,常用的染料为PI,DAPI。
流式细胞仪要求:488nm光源,575nm滤光片。
⑵、细胞生存能力实验
使用Heochest 33342染料与DNA特异性结合,后因细胞活力不同染料的结合程度也各异,故可评估细胞的活性度。
流式细胞仪要求:360nm光源,455nm滤光片
⑶、计数外周血中检测网织红细胞
使用TO染料能够特异性地与RNA结合,结合系数高达3000,故具有很好的性价比。
流式细胞仪要求:488nm光源,525nm滤光片,液量绝对计数系统
⑷、外周血、骨髓采集物中CD34阳性干细胞计数,临床上用于骨髓移植前干细胞数理的测定
使用标准ISHAG方案,需要DNA或其他核染料占用FITC通道,PE标记CD34抗体,PE-CY5标记CD45抗体。
流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量绝对计数系统
⑸、交叉淋巴细胞、粒细胞毒实验
检测识别供体血清中免疫球蛋白与受体粒细胞之间是否存在反应有着重要临床意义,因为这种反应会导致移植后发热、移植后肺损伤及免疫性粒细胞缺乏症。流式细胞仪可检测全血样本与血清孵育后粒细胞上结合的人免疫球蛋白。FITC标记人免疫球蛋白抗体、PE标记粒细胞表面标志物、PE-CY5标记HLA抗体。
流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片
⑹、血小板自身抗体检测
血小板自身抗体识别人血小板抗原,会引起各种临床相关症状,如新生儿自免性血小板减少症、输血后紫癜、难治性血小板减少。流式细胞可快速准确地检测血小板自身抗体。FITC标记抗人免疫球蛋白抗体、PE标记识别血小板抗体。
流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片

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