扩增技术搭配NK细胞疗法，以色列公司1期临床结果积极
NK细胞，又称自然杀伤细胞(Natural Killer Cells)，是白细胞的一种，在免疫系统的抗癌斗争中发挥着重要作用。基于T细胞的癌症免疫疗法已经在血液肿瘤领域大放异彩。然而，由于制备功能细胞等问题，NK细胞在临床环境中的适用性受到了限制。
总部位于以色列的Gamida Cell公司正在开发一种基于烟酰胺(NAM)的细胞扩增技术，应用于产生高功能性NK细胞。先前研究表明，与正常NK细胞相比，NAM-NK细胞增殖更快，寿命更长，尤其擅长产生炎症分子，并将其他免疫细胞招募到肿瘤中。此外，当与靶向抗体组合时，NAM-NK显示出增强的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。
近日，2019年美国移植和细胞治疗(TCT)会议上，该公司报告了人类白细胞抗原(HLA)-半相合(haploidentical)或HLA-不匹配(mismatched)相关供体NAM-NK细胞疗法，针对复发/难治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)和多发性骨髓瘤(MM)患者的首次人体试验的初步临床数据。
正在进行的1期研究数据显示，前14名患者中，3名NHL患者观察到完全反应，1名MM患者观察到完全反应，并且NAM-NK通常耐受良好。初步数据支持持续的临床开发。
独特的扩增技术，助力NK疗法
基于烟酰胺(NAM)细胞扩增平台的作用机制：
？NAM在细胞的代谢重编程中起关键作用；
？NAM是NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)相关信号通路的主要调节因子；
？直接参与控制氧化还原敏感酶、线粒体功能、细胞代谢、能量产生、细胞运动；
？NAM在扩大培养期间保留细胞功能和表型。
1期临床数据积极
『背景』
NK细胞的过继转移受限于NK细胞的短期持续性及其在输注后受损的效应功能。先前已经表明，用NAM离体扩增NK细胞促使对多种肿瘤细胞系的有效细胞毒性，以及体内稳健的归巢，增殖和驻留。以下报告NAM-NK在复发/难治性NHL和MM患者中的首次人体试验。
『方法』
在供体单采血液成分术后，将CD3耗尽的单核细胞在NAM(5mM)和IL-15(20ng/ml)存在下培养2周。受试者首先接受一轮环磷酰胺和氟达拉滨化疗，以消耗其免疫细胞，包括患病的免疫细胞。
然后他们接受递增剂量的NAM-NK细胞(第0天和第2天)和低剂量白细胞介素-2以促进NK细胞的扩增。将利妥昔单抗(rituximab)或埃罗妥珠单抗(elotuzumab)分别给予患有NHL或MM的患者，以促进肿瘤靶向和抗体依赖性细胞毒性。
『结果』
所有14名患者：包括6例NHL患者和8例MM患者，均可评估安全性，其中12名可评估治疗活性(所有6名NHL患者和8名MM患者中的6名)。大多数患者经过大量预处理并患有晚期疾病。
在6名NHL患者中，3名患者(滤泡性淋巴瘤2名患者，弥漫性淋巴瘤1名患者)获得完全反应，1名患者获得部分反应，2名患者疾病进展。获得完全反应的2名患者随后接受了骨髓移植。在可评估的6名MM患者中，1名患者获得完全反应，2名患者疾病稳定，3名患者疾病进展。在评估的所有三个剂量水平观察到活性。
NAM-NK通常耐受良好，没有移植物抗宿主病(GvHD)，没有肿瘤溶解综合征，也没有观察到神经毒性综合征。观察到3级(n = 3)和4级(n = 1)血液学不良事件。非血液学不良事件多为1级和2级。有1例3级细胞因子释放综合征，1例因败血症死亡。
『结论』
NAM-NK细胞已被安全地给药，耐受性良好，增殖并在体内持续存在。在患有晚期疾病的患者中观察到有希望的临床活动早期证据。
基于正在进行临床试验的积极结果，2月19日，Gamida Cell与领先的基因组编辑公司Editas Medicine达成协议，评估在NAM-NK细胞中使用CRISPR基因组编辑技术。通过该协议，两家公司旨在发现可用于改善血液系统恶性肿瘤和实体瘤治疗的优化NAM-NK细胞。
NK细胞治疗，令人兴奋的前景
NK细胞是人体先天免疫系统的一部分。它们是淋巴细胞，来自与T细胞和B细胞共享的祖细胞。NK细胞能对身体内遇到的各种病原体迅速作出反应，是身体正常的癌症对抗储备，因此得名(自然杀伤细胞)。
这种杀伤能力是由于癌细胞分裂错误或DNA复制导致突变表达，使得机体确定需要破坏它们时产生的。在突变表达影响其他细胞或自身增殖之前，NK细胞识别并摧毁之。
NK细胞还可以招募其他细胞，例如巨噬细胞和树突状细胞，以增强免疫反应并吞噬残留的细胞物质。
近年来，研究人员正在使用NK细胞用于抗肿瘤治疗，这是令人兴奋的，原因有几个。
首先，因为NK细胞已经在寻找具有致突变性的特定细胞表达，所以它们不需要像CAR-T细胞那样为每种单独的癌性抗原提供相同类型的抗原呈递引发剂。这意味着这些NK细胞可用于多种不同的癌症和多种不同的患者，并且具有可能相似的结果。
其次，这种治疗的毒性对于长期损害或后期效应的潜在影响较小，因为它们动员已经存在于体内的先天免疫系统。
NK细胞另一个非常有趣的特性是它们不会引起移植物抗宿主病(GvHD)。数百名甚至数千名患者，已经接受同种异体NK细胞或与患者不匹配的NK细胞治疗，并且很少被报道GvHD。仅有一项研究表明，在移植过程中，在不存在免疫抑制的情况下，将NK细胞注入患者体内，与GvHD相关。
致力于这一免疫疗法新方向的研究组织有不同的产生NK细胞的方法，一种是使用患者自己的NK细胞，而另一种方法是使用别人的NK细胞。而使用患者自己的NK细胞存在两个问题：
肿瘤细胞有免疫逃逸机制，患者自己的NK细胞常常因为被干扰而存在功能异常
常规的化疗可能造成健康NK细胞采集数量不足
因此，临床试验常使用异体NK细胞，来源包括：健康志愿者捐献、脐带血、多能诱导干细胞(ipsC)。相对于志愿者捐献，以标准化的“现成(off the shelf)”方式制备的干细胞来源NK细胞更加易于获得，同时患者等待治疗时间较短。
MD安德森癌症中心的研究人员正在研究CAR-NK细胞疗法，但使用脐带血并分离出NK细胞。他们插入了识别CD19的CAR，目前正在进行2017年开始的临床试验(NCT03056339)。受试者患有复发性疾病，并且正在关注B淋巴恶性肿瘤、非霍奇金淋巴瘤以及急性和慢性淋巴细胞白血病。
Fate Therapeutics正在利用人类诱导多能干细胞(iPSCs)来产生NK细胞产品。通过采集皮肤细胞或血细胞，并提供诱导信号，可以恢复它们的多能干细胞状态，这意味着研究人员可以简单地通过使用适当的信号分子得到任何需要的细胞，然后诱导它们成为NK细胞，并且所有这些都是在实验室环境中进行的。这种“现成的”治疗方法，有望避免患者个性化治疗方法带来的限制。2018年11月，该公司宣布FDA已经批准ipsC衍生的同种异体NK细胞疗法(FT500)的IND申请。
2018年6月，在Cell Stem Cell期刊上发表的一项新研究中，加利福尼亚大学圣地亚哥医学院(UCSD)和明尼苏达大学的研究人员报告说：ipsC来源的CAR-NK细胞表现出与CAR-T细胞相似的活性，但毒性较低。数据显示卵巢癌是一个很好的第一目标，但包括乳腺癌、脑肿瘤和结肠癌等在内的实体瘤，以及白血病等血液肿瘤也可能是潜在的治疗对象。
