关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

盘基网柄菌的培养方法实验——相关细菌存在时的悬浮培养

2019.4.02
实验材料

培养物

试剂、试剂盒

Sorensen's 缓冲液

仪器、耗材

SM 琼脂平板玻璃棒Erlenmeyer 锥形烧瓶

实验步骤

1. 用 1 ml 大肠杆菌 B/r 的过夜培养物接种 15 cm 的 SM 琼脂平板,均匀涂布平板表面。

2. 用玻璃棒收获厚菌苔,并充分重悬于 10 ml 1X Sorensen's 缓冲液中,用 10 ml 1X Sorensen's 缓冲液洗平板一次,并加到细菌悬液中。向细菌悬液中加入 40 ml 1X Sorensen's 缓冲液并充分旋转混匀。这种细菌储存液可于 4℃ 储存 1 周。

3. 加 5 ml 细菌储存液到一个灭菌的 50 ml Erlenmeyer 锥形烧瓶中,与来自一个果实体的一个孢子头共同孵育。

4. 于室温以 240 r/min 振荡培养 16~24 小时。

5. 用血细胞计数器计数细胞数。

6. 以此培养物作为所需体积新培养物的种子液。

7. 以 100 g 离心力进行差速离心 2~5 分钟,除去残留的细菌以收获细胞,将细胞重悬于 1X Sorensen's 缓冲液,再次离心沉淀细胞。

展开


推荐
关闭