结缔组织染色实验——胶原纤维染色
结缔组织广泛分布于入体和动物体内,而疏松结缔组织在组织损伤后的修复过程中,纤维细胞可转化为活跃的成纤维细胞。成纤维细胞能形成胶原纤维、弹力纤维和网状纤维以及基质等成分。致密结缔组织的间质内含有大量纤维,排列紧密,细胞和基质比较少,主要含有弹性纤维,又称为弹性致密结缔组织。网状结缔组织由网状细胞和网状纤维组成,其化学成分含有蛋白质和多糖。通过染色试剂,能够证明结缔组织纤维分类和纤维之间存在的相互关系。
实验方法原理 | 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 丽春红-苦味酸染色液:0.5% 丽春红 S(Ponceau S)水溶液 12 ml,苦味酸饱和液 88 ml。 1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。 2. 丽春红-苦味酸染色液染色 5 min。 3. 直接用无水乙醇分化与脱水。 4. 用过滤纸吸干。 5. 二甲苯透明和中性树胶封固。 展开 |
注意事项 | 1. 丽春红-苦味酸混合液可室温存放,使用滴染方法。 2. 无水乙醇脱水时,应将切片斜放,减少多余水分。 |
其他 | 结果:胶原纤维呈红色,背景呈黄色。 |
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