自建检测系统校准程序

　　1、目的：建立和实施自建检测系统的校准程序，以确保病人标本的检测结果可溯源到同一个测量基准（国家标准或国际标准），从而使检测结果的准确性和一致性得到技术保证。

2、范围：适用于检验科所有的自建检测系统

3、职责：

3、1各专业组组长负责制定和实施本组自建检测系统的校准计划；

3、2技术负责人负责校准计划的审核、批准

4、定义和术语

4、1检测系统　完成标本检验必需的仪器、试剂、校准品、校准计划和检测程序等的组合成为检测系统。严格讲，检测系统是针对每个检验项目的，因此，仪器上能同时做多少检验项目，就有多少个项目的检测系统。为了使临床实验室对患者标本检测结果具有可比性，保持检测系统的组合稳定性是保证检测结果质量的重要内容。

4、2　自建检测系统　由实验室按照自己的意愿，选择需要的仪器、试剂、操作程序等组合的检测系统，以完成患者标本的检验。

4、3　溯源性　通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。

5、校准程序

5、1校准前的准备

5、1、1仪器的完善保养

　　　　重视仪器的定期保养和维护是实现溯源性的前提之一。在校准之前必须常规对仪器进行定期保养和维护，使仪器一直处于良好的工作状态。

5、1、2选择性能良好的试剂盒

　　　　实验室在获得批准的试剂盒厂商中，挑选适合自己仪器的产品。并且，一定要经过使用和实验，有精密度、可报告范围和其他试剂或其他实验室实际标本对照的数据资料，初步说明分析性能可以接受。被选择后，在正式用于临床检测患者标本前，实验室应书写完整和详细的操作规程。经选择后，必须长期稳定，不任意变换其他公司产品、或同公司的其他规格的产品。

5、1、3确定实验室溯源性的目标

　　　本实验室校准的目标向原检测系统靠拢。如果实验室使用的仪器原先就没有原检测系统的，可以选择在实验室附近的医院实验室内，具有国际上知名的、他们正使用原检测系统进行检验的系统为目标。

5、1、4在实现溯源性的目标过程中，永远以患者的新鲜标本为实验对象、永远以方法学比较实验方式为验证手段。

5、2　实现自建检测系统溯源性的步骤（以ADVIA1650实现溯源性为例）

5、2、1确定以XXX医院检验科罗氏系统为实验室实现溯源性的目标。因此实验室要准备充分的罗氏试剂盒、校准品。另外，实验室也要准备充分的自建检测系统中的试剂盒。每个试剂盒和校准品都应该是同批号的。

5、2、2对ADVIA1650仪器进行一次完整的保养，确认仪器处于良好状态。确保用于仪器上的水质优良。

5、2、3所有实验过程都必须有分析过程的质量控制。确认同批实验的质量控制结果在控的前提下，采集实验数据。

5、2、4使用自选试剂盒，在ADVIA1650仪器上进行精密度实验。如果实验室已经使用该试剂盒有一段时间，实验室积累了多月的天间质量控制结果，能够说明精密度的水平，可以不做。判断精密度水平是否符合要求，一般的检验项目以CLIA88允许误差的1/4为指标（不能超出根据生物学变异确定的不精密度要求）。不能实现精密度要求的，应首先解决问题后再做以下实验。如果为新选择的试剂盒，使用控制品进行批内和天间的两个精密度实验。

5、2、5对自选试剂盒和ADVIA1650仪器组合的可报告范围的评估。要求可报告范围上限不低于试剂盒厂商说明书上声明的限值。也就是在该限值的范围内，患者标本检测值的高低确实具有比例关系。以后实验时，检测数据只能在该确定的范围内有效。

5、2、6　在上述确定的可报告范围内，进行初步的方法学比较。有关方法学比较实验的完成方案参见《实验室间及实验室内部比对程序》。相关系数超过0.975，说明两方法间的系统误差可以用得到的直线回归式进行分析。在为自建检测系统确定校准关系时，希望方法学比较的截距要小，这样，以原检测系统检测患者标本结果来校准自建检测系统将具有较理想的效果。而且，若方法学比较结果不仅截距小。斜率极其接近1，这意味着实验室自建检测系统对标本的检测结果，和溯源目标检测系统对标本的检测结果非常接近。方法学比较截距很大，斜率偏离较大，如果在可报告范围中，也出现截距明显、斜率不太理想的情况时，可以说明自建系统的分析性能存在问题。应首先解决自建系统的问题（例如：试剂盒的再选择、仪器的保养和维修），停止以下实验。

5、2、7以患者标本为临时校准品，对自建系统的校准

在以上实验的基础上，已经证明：自建系统的精密度、可报告范围符合要求；方法学比较结果说明，自建系统对患者标本的检测结果，和溯源目标系统相比，系统误差的主要问题是斜率反映的比例误差。这样，在经患者标本为临床校准品，对自建系统校准时，如果方法学比较实验的患者标本量较多，使用其中含分析物含量适中的某个标本，或者另外寻找一份混合血清（要求经过初步检测，内含分析物含量适中）为临时校准品。以罗氏系统对选择的标本进行多次（不少于3次）检测，取均值。在自建系统上，以该血清为临床校准品，用罗氏系统检测的均值为校准值，对自建检测系统校准。然后，再对一批患者标本血清（内含分析量分布于整修可报告的范围）进行经血清校准后的自建系统与罗氏系统方法学比较实验。如果回归统计的斜率有明显改善（和1接近）；而且，截距保持原有水平，甚至有所改善。计算每个患者标本两个系统结果的差异，观察所有标本结果差异分布上的趋势和个别标本差异明显的情况。若能保持所有标本结果差异在CLIA88允许误差的1/4内（不超过根据生物学变异确定的不精密度要求），说明实验（以新鲜血清为临床校准品的校准）成功。若有了改善，但是，还没有达到所有标本结果差异在CLIA88允许误差的1/4内（不能超过根据生物学变异确定的不精密度要求）；对临时校准品的血清再次用罗氏系统检测，观察有无偏倚，纠正后，重复上述的实验，直到成功。

5、2、8建立“自建检测系统”的稳定校准品。在以上实验基础上，寻求稳定校准品是保持使用自建检测系统对患者标本检测结果可以溯源至目标检测系统的关键。购买一批质量好、知名度高的公司冻干控制品，这将是自建“检测系统”的校准品（以下将简称自建校准品）。为了能长期具有溯源性，最好能考虑使用2－3年的量。

购买的控制品，只是把它当作准确度传递的工具，办要求瓶间差小、内含分析物稳定。根本不采用原公司的定值。按照使用要求，复溶控制品。将控制品当作一个样品，在经血清校准后的自建系统上进行多次检测（至少3次以上），取均值。在保持原自建检验系统上的仪器、试剂盒、操作程序不变的情况下，以该控制品的检测均值为“校准值”，使用该控制品对自建检测系统校准。然后，再对一批患者血清（内含分析物量分布于整个可报告范围）进行经血清校准后的自建系统和罗氏系统方法学比较实验。如果回归统计的斜率和1很接近；截距保持原有水平，甚至有所改善。计算每个患者标本两个系统结果的差异，观察所有标本结果差异在CLIA’88允许误差1/4内（不能超过根据生物学变异确定的不精密度要求），说明“自建校准品”对“自建检测系统”校准成功。自此，实验室建立了自己的完整检测系统。

如果方法学比较结果不如使用血清为临床校准品的比较结果，说明直接对控制品检测值还不是最佳值。可以根据所有标本结果差异分布上的趋势，对控制品的检测值做微小的调整，再进行方法学比较实验。如此反复的实验，直至实现所有标本结果差异在CLIA’88允许误差1/4内（不能超过根据生物学变异确定的不精密度要求），说明“自建校准品”对“自建检测系统”校准成功。这样，包括仪器、试剂盒、“自建校准品”、和操作程序，实验室建立了自己的完整检测系统，确保该系统对患者标本的检测结果可以溯源至罗氏系统。因为罗氏系统对患者标本检测结果可以溯源至参考系统，这样，自建检测系统也就实现了可溯源至参考系统的目的。

支持性文件：

检验方法选择和评审程序

实验室间和实验室内部比对程序

美国CLIA’88