扩展阅读：GCaMP钙离子成像中，视网膜上两个神经细胞表现出相反的钙离子浓度变化（A浓度高的时候B浓度低，B浓度变高时A浓度下降），如何采用Reslice方法在平面图中反映出这种关系，敬请参阅链接中文章第14-16步：点击进入了解>> 

W-View GEMINI应用实例4——心肌细胞搏动时钙离子浓度的变化与细胞收缩在时间上的先后分析

除了两个不同颜色的荧光同步成像之外，W-View GEMINI还可以用于荧光和明场的同步成像。在这个例子中，研究者同步拍摄监测了心肌细胞波动时的钙离子浓度变化以及细胞收缩的情况。蓝光激发发绿色荧光的Fluo-8被用于钙离子浓度的监测，而明场的相差（phase contrast）成像则是采用了600-680nm的红光。通过对单个细胞中钙离子浓度和相差图像的分析，可以看出钙离子的浓度上升是稍稍领先于心肌细胞的收缩的。

这一类实验中，明场透射光的信号是比荧光信号强很多的，除了可以在明场透射光光路中加入减光片将两个信号调整得差不多之外，更方便的方法是利用Flash 4.0 LT可以针对芯片两半分别调整曝光时间的特点进行更加灵活的调整（参考本文相关段落：双色同步成像——一台Flash 4.0 LT相机作两台用）。

W-View GEMINI应用实例5——斑马鱼双色双光子lightsheet成像

在国内，北京大学的研究者也采用W-View GEMINI在他们自己设计搭建的双色双光子lightsheet成像系统中。系统采用两台飞秒激光器作为光源分别双光子激发两个颜色的荧光探针，进行双色的3维lightsheet成像。样品是3天大小的斑马鱼，红色和绿色的荧光探针分别标记着红细胞和胰岛细胞，为了能够尽可能缩短3维图像的采集时间，以防红细胞在血管中的移动影响成像质量，系统中采用了W-View GEMINI进行了双色的分光，让Flash 4.0 V2相机同步对红细胞和胰岛细胞进行成像。

http://v.youku.com/v_show/id_XMTI3NjQzMjA1Mg==.html

扩展阅读：更多的资料可以参考其在滨松显微成像大赛上的投稿。其独特的高速三维lightsheet成像方法2P3A-DSLM的介绍可参考其已发表的论文。

更多双色同步成像的文献与应用实例

1. 单分子多色FRET，采用滨松Flash 4.0 & W-View GEMINI，通过cy3/cy5/cy7的组合分析核糖体与tRNA的相互作用：

Juette MF, et. al, The bright future of single-molecule fluorescence imaging, Curr Opin Chem Biol. 2014 Jun 20;20C:103-111.

推荐产品