高效液体相色谱法（HPLC）“瘦肉精”检测的液体处理
简介
“瘦肉精”是一类动物用药，有数种药物被称为“瘦肉精”，例如莱克多巴胺（Ractopamine）及克伦特罗（Clenbuterol）等。“瘦肉精”能使猪提高生长速度、增加瘦肉率、猪毛色光亮，卖相好、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但对人体会产生副作用，轻则导致心律不齐，严重会导致心脏病。
目前检测瘦肉精的方法有：气相色谱-质谱法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、霉联免疫吸附法（ELISA）和液相色谱-质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)等。
现以高效液相色谱法为例，分别介绍RXS-200标样稀释仪、EL系列多功能液体操作仪—在液体处理方面的应用。
实验目的：
定量检测样品中猪肉盐酸克伦特罗的含量
应用行业：食品检测
实验步骤：
第一步：进行样品处理，设定色谱条件，使用高效液相色谱仪进样10ul分析。
第二步：按照下表制备标准序列液
样品杯号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
母液 | 盐酸克伦特罗试剂 （100ug/ml） | 200ul | 400ul | 600ul | 800ul | 1000ul | 2000ul |
稀释液 | 蒸馏水 | 9800ul | 9600ul | 9400ul | 9200ul | 9000ul | 8000ul |
浓度(100ug/ml) | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 20 | |
稀释比 | 2% | 4% | 6% | 8% | 10% | 20% |
一：使用EL-211(双通道)多功能液体操作仪制备标准序列液
1. 执行充液任务，使稀释液充满整个管路
2. 按照软件向导建立稀释任务，稀释模式选择“自定义”将各序列液的稀释比设置界面，稀释后的总体积设置为10ml
3．点“执行”按钮，按照提示操作，按手动按钮，先进行空气隔离，然后母液从手柄端口吸入系统：
4. 按“手柄按钮”或触摸屏的“确定”按钮或 “脚踏板”，仪器将第一个序列液分配到试管1中；
5. 重复以上操作“2”“3”“4”步骤，序列液分配到试管2中，依次类推制备其他各序列液
二：使用RXS-200标样稀释仪制备标准序列液
1.将子母液的注射器充满对应的液体，将出液口空气排干净；
2.进入“手动工作准备”界面，对S1和S2进行下复位操作，然后把注射器装上仪器并且将针管安装好；
3.返回主界面，点击“序列稀释”，进入该界面进行参数设定，选择“自由单排模式”、稀释次数设为“6”、稀释比参数选择“逐个”和“比例递增”、初始%值设为“2”、体积/母液浓度参数选中“等总体积”输入值10ml；
4.点击“启动任务”，然后将试管1的口对准设备针管出液口，点击界面上的“确定”或者面板上的按键开关，进行取液，完毕后得到1号稀释液；按照界面提示操作，依次类推，取出2、3、4、5、6号稀释液。
第三步：将各序列液依次进样10ul分析，用盐酸克伦特罗试剂（100ug/ml）为对照，用保留时间进行定性，用峰面积定量；
第四步：依照公式进行计算：
X={(m/1000)/1000}/{(M/1000)/V1}×（V2/1000）
X: 样品中盐酸克伦特罗含量（mg/kg）;M;样品取样量(g)； m:样品中盐酸克伦特罗（ng）;V1:样品定容体积 ; V2:样品进样体积（ul）
