图11-13分别为两种奶粉和一种液态奶实际样品分析色谱图及结果。

由图14，三种乳清蛋白的标准品、实际样品和样品提取液的空白溶液的重叠色谱图，可以看到，在奶粉和牛奶的提取溶剂中，不存在对样品中乳清蛋白分析物的干扰。另外参见下图15，是牛奶样品和牛奶样品最后添加标准品的色谱图，可以进一步定性牛奶提取样品中三种乳清蛋白的存在。同时发现，乳清蛋白标准品用水或样品提取液（含Triton X-100的NaCl溶液）定容，进样检测对三种乳清蛋白的峰面积基本没有影响，图16是两种定溶液标准品的重叠色谱图。

由图14，三种乳清蛋白的标准品、实际样品和样品提取液的空白溶液的重叠色谱图，可以看到，在奶粉和牛奶的提取溶剂中，不存在对样品中乳清蛋白分析物的干扰。另外参见下图15，是牛奶样品和牛奶样品最后添加标准品的色谱图，可以进一步定性牛奶提取样品中三种乳清蛋白的存在。

同时发现，乳清蛋白标准品用水或样品提取液（含Triton X-100的NaCl溶液）定容，进样检测对三种乳清蛋白的峰面积基本没有影响，图16是两种定溶液标准品的重叠色谱图。

重现性

5ppm标准品八次进样的重叠色谱图及重现性结果
如下:

结论

本文建立了用Waters UPLC-TUV系统检测奶粉和牛奶实际样品中Bα-La、Bβb-Lg和Bβa-Lg三种牛乳清蛋白的定量分析方法。方法的检出限为1μg/g。使用Waters ACQUITY UPLCBEH300 C18色谱柱和三氟乙酸添加剂流动相，使Bβb-Lg和Bβa-Lg两种遗传变异体可达到基线分离；采用280nm检测波长，有效降低了低波长检测下的流动相干扰，可以用于奶粉和牛奶中三种牛乳清蛋白的含量测定。

参考文献

[1] Kinghorn N M，Norris C S，Paterson G R. Chromatogr A，1995，700:111
[2] 蔡增轩，储小军等. 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集，KB02:23-24
[3] 李慧，陈敏等.色谱.2007.1，25:116-117[4] Ena J M，van Beresteijn E C H，Robben A J P M，Schmidt D G.J Food Sci，1995，60(1):104