鬼峰产生的缘由是多种多样的，根据本人的阅历以及文献报道，将缘由归结为以下几个方面：

　　1、活动相、样品稀释液、仪器或是容器中存在杂质，当梯度开端时由于有机相比例不高，洗脱才干不强，杂质在色谱柱柱头富集，随着活动相比例变化，洗脱才干增强，富集的杂质被洗脱，从而构成鬼峰。

　　2、活动相脱气不完好。空气在有机相和水中的溶解度不同，当水和有机相混合时，气泡就产生了

　　3、操作问题

　　1、试剂问题

　　a) 有机溶剂

　　甲醇制备工艺相对乙腈来说较为简单，杂质含量也较少。但是由于甲醇紫外吸收范围比乙腈广，所以当运用紫外检测器时，特别是波长较低时，尽量运用乙腈作为有机相，用甲醇的话漂移太大。而用作梯度色谱的乙腈质量恳求较高，普通用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的呈现。

　　b) 水

　　很多单位用自制蒸馏水作为水相，但是结果并不是很好。缘由就是一些低沸点的有机杂质并不能够经过蒸馏除掉。有条件的尽量用HPLC级的纯水，没有条件的也可用娃哈哈或是屈臣氏等水替代，但是假设色谱条件比较严厉也是有可能出问题的。

　　c) 其它试剂

　　缓冲盐、TFA、EDTA等试剂也会对活动相构成很大的影响，尽量用纯度高的试剂配制活动相。

　　2、仪器问题

　　a) 液相的活动相管路被污染。

　　长时间的运用含水量较高的活动相(特别是参与缓冲盐的)，细菌就容易在管路中滋生，细菌的代谢产物或是细胞碎片能构成鬼峰。

　　b) 保送泵缺点，构成系统压力不稳，从而产生鬼峰。

　　c) 单向阀堵塞，构成系统压力不稳，从而产生鬼峰。早期岛津的液相单向阀貌似不能用纯乙腈作为活动相，往常应该曾经得到改进。

　　二

　　1、 在线脱气机脱气不完好。

　　2、 两种活动相的有机相比例相差太大。例如A为100%水，B为100%乙腈。在梯度条件允许的情况下尽量减少两中活动相之间的差距，降低空气在两中活动相中溶解度的差异，从而减少气泡的产生。

　　3、 活动相配置好后预先超声脱气。

　　三

　　1、活动相配置过程中遭到污染

　　a) 盛放活动相的容器或是量具遭到污染。

　　这种污染可能来自于洗濯剂、铬酸洗液或是其他实验人员用完后的残留杂质。活动相容器的清洗普通用干净的水+有机溶剂涮洗就行，过多的清洗步骤反而可能构成二次污染。有时活动相容器的塑料盖碎片都有可能是杂质的来源。

　　b) pH计。

　　很多pH计以聚碳酸酯作为外壳，但是聚碳酸酯是可以溶于有机溶剂的，所以尽量运用玻璃pH计来丈量活动相的pH。

　　c) 滤膜。

　　劣质的或者型号错误的滤膜常常是鬼峰呈现的缘由。

　　d) 放置时间过长。

　　活动相在空气中暴露时间过长，就可能吸收空气中的有机杂质，有时活动相中的添加剂，例如TFA，时间长了会氧化从而产生杂质。

　　2、仪器样品稀释液与活动相极性或者pH相差太大。

　　这也是招致鬼峰的缘由之一，这种问题很有可能招致样品分为两个不同的阶段出峰，从而产生双峰或者多峰。

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