三十五项淘汰临床检验项目、方法及替代实验(15)

三、甲状腺激素结合试验C2SI-TsU试验

(一)原理

　　甲状腺激素与TBG、TBPA及Alb结合，其中以TBG为最重要，因TBG与T₄的亲和常数大于T₃的亲和常数，T₄和TBG结合比T₃牢固，所以TBG的含量对T₄的影响更明显。血清TBG含量的增加或减少可使血清TT₄值增高或降低。为消除TBG含量变化对TT₄值的影响，提高其诊断符合率，须用甲状腺激素结合试验（¹²⁵I-T₃U试验)对血清TT₄值进行校正。甲状腺激素结合试验是用以测定血清甲状腺激素结合蛋白的空余结合位点(剩余结合容量)的试验。若将待测血清与过量的¹²⁵I-T₃U温育，使之与TBG上的空位结合，再用树脂或葡聚糖凝胶、活性炭、大颗粒聚合清蛋白等把游离的¹²⁵I-T₃U和与TBG结合的¹²⁵I-T₃U分开，可以测定树脂摄取的放射性，即¹²⁵I-T₃U游离部分的放射性。以加入总放射性的百分数表示为¹²⁵I-T₃摄取率(％)，与正常标准血清相比的比值表示，则为摄取比值(¹²⁵I-T₃R UR)。在TBG浓度正常的情况下，在正常人、甲亢及甲低病人中血清TT₄值和¹²⁵I-T₃RUR向同一方向变化，TT₄值升高时¹²⁵I-T₃RUR亦升高，TT₄值降低时T₃RUR亦降低。当TBG浓度异常时，血清TT₄值和¹²⁵I-T₃ RUR呈相反方向变化。在TBG浓度升高时，血清TT₄值升高，¹²⁵I-T₃RUR降低；TBG浓度降低时，血清TT₄值降低，¹²⁵I-T₃RUR升高。

(二)性能

1．配合TT₄测定，计算游离甲状腺素指数。

2．在血清TBG浓度正常情况下，可间接反映TT₄水平，作为甲状腺功能检查的一项指标，甲亢时T₃RUR升高，甲低时T₃RUR降低，但对甲亢的诊断率较甲低为高。

(三)操作方法

　　按试剂盒的说明书进行操作。现以一种常用的¹²⁵I-T₃树脂摄取试验试剂盒为例说明：

1．试剂盒组成

（1）参考血清
　　正常值　　l瓶(冻于)
　　高值　　　1瓶(冻干)

（2）高浓度缓冲液　　2瓶(共20m1)

（3）¹²⁵I-T₃溶液　　　l瓶(液体)

（4）树脂片　　　　　1瓶(100粒)

2．试剂的配制。

(1)参考血清：每瓶加入蒸馏水(或生理盐水)lml。

(2)缓冲液：将2瓶高浓度缓冲液加100mi蒸馏水稀释。

(3)在稀释好的120ml缓冲液内，加入¹²⁵I-T₃320μ1，即为¹²⁵I-T₃工作液，贮存在4℃冰箱中。

3．分析步骤

(1)待试剂充分溶解，混匀，即可按表3顺序加样。

　　表3¹²⁵I-T3U操作顺序表

(2)在4℃冰箱内，放置10分钟。

(3)各管中均加树脂片1粒。

(4)在震荡器上振动10分钟。

(5)测每管总放射性(或测三管总放射性取平均值)。

(6)弃上清液，用蒸馏水2ml洗树脂一次。

(7)测每管树脂放射性。

4．结果计算

　　　　　　　　　　　　　树脂放射性－本底
（1）¹²⁵I-T₃树脂摄取率＝－－－－－－－－－
　　　　　　　　　　　　　总放射性－本底

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　样品¹²⁵I-T₃树脂摄取率
（2）¹²⁵I-T₃树指摄取率比值(RUR)＝－－－－－－－－－－－－－－－－－
　　　　　　　　　　　　　　　　　　正常血清树脂摄取率（双份平均）

（3）FT₄＝血清总T₄值×¹²⁵I-T树脂摄取比值(RUR)

5．操作注意事项

(1)收到试剂盒后，4—8℃存放。试剂溶解后4—8℃存放。

(2)室温高于25℃时，对实验有影响，应采取措施。

(四)参考值

　　随所用的吸附剂及方法不同而异。以¹²⁵I-T₃树脂摄取试验为例，T₃RUR介于0.8—1.2；男略高于女

?四、游离甲状腺素指数(FT₄1)测定

(一)原理

　　当TBG浓度正常时，在正常人、甲亢及甲低病人中T₃RUR和血清TT₄的浓度变化相平行。但当TBG浓度异常时，二者结果向相反方向变化。游离甲状腺素指数(FT₄I是TT₄和¹²⁵I-T₃RUR的乘积，二者相乘校正了因TBG容量改变对TT₄值的影响。FT₄I血清FT₄值呈正相关，能代表血清FT₄的相对值，因此称作游离甲状腺素指数。

(二)性能

　　由于生理、病理因素引起TBG浓度异常时，在不能进行FT₄测定的情况下，FT₄1作为血清FT₄的相对值，可较准确地反映甲状腺功能。如妊娠时血清TBG升高，血清TT₄高于正常，数值在甲亢组范围内，而T₃RUR低于正常，呈现甲低的数值，如单独依靠血清血清TT₄或T₃RUR结果判断，易误诊为甲亢或甲低，绝大多数FT₄I在正常范围。

(三)方法

　　同时测定病人血清TT₄及¹²⁵I-T₃RUR，按下列公式计算：FT₄I＝TT₄×T₃RUR

(四)参考值

　　应根据各实验室的T₃RUR和TT₄值求得参考范围，参考正常值为4.7－11.9。