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如何处理液相色谱柱严重拖尾

2018.3.02

液相色谱柱使用常见问题解决:

一、拖尾原因解决方法

原因:1、筛板阻塞

解决方法:1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱

 

原因:2、色谱柱塌陷

解决方法:2、填充色谱柱

 

原因:3、干扰峰

解决方法:3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱

 

原因:4、流动相PH选择错误

解决方法:4、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰

 

原因:5、样品与填料表面的溶化点发生反应图

解决方法:5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 

 

二、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因  解决方法

原因:1、柱外效应

解决方法:1、a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路) b、使用小体积的流通池 G、 K

 

三、增加时,脱尾更严重原因解决方法  

原因:1、二级保留效应,反相模式

解决方法:1、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品) d、更换一支柱子  

 

原因:2、二级保留效应,正相模式

解决方法:2、a、加入三乙胺(或碱性样品) b、加入乙酸(或酸性样品) c、加入水(或多官能团化合物) d、试用另一种方法  

 

原因:3、二级保留效应,离子对

解决方法:3、加入三乙胺(或碱性样品)

 

四、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决方法

原因:1、缓冲不合适  

解决方法:1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液 

 

五、额外的峰原因 解决方法

原因:1、样品中有其他组份  

解决方法:1、正常

 

原因:2、前一次进样的洗脱峰

解决方法:2、a、增加运行时间或梯度斜率 b、提高流速

 

原因:3、空位或鬼峰

解决方法:3、a、检查流动相是否纯净  b、使用流动相作为样品溶剂 c、减少进样体积


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