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沉淀DNA的实验

2020.8.11

实验材料 DNA

试剂、试剂盒 乙酸钠乙醇

仪器、耗材 EP管低温离心机移液器-70度冰箱

实验步骤

  1. 酶切前确定待切样品的浓度, 并选择合适的限制性内切酶和配套Buffer。

2. 在离心管中加入如下成分:

10×Buffer   1μl

待切样品   xμl

酶      0.5-1μl
————————————
   加水补足10μl

3. 混匀样品并短暂离心使样品沉于管底。

4. 将离心管置于37℃中温育1-3hr,若待切样品为PCR 产物,则可将反应时间适当延长。

5. 用未酶切的质粒作为对照,琼脂糖电泳鉴定酶切结果。
 

注:当酶切样品用于回收而不是鉴定时,可按比例适当加大反应体积。双酶切可选用二者活性都较高的Buffer 或者通用Buffer,但要注意不能有星反应。

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