荧光PCR时ct值大于30
看了你空间里的溶解曲线，你可以看到溶解峰的温度都很低，全在80以下，你扩出来的东西多半只是引物，你跑定量的时候有做NTC的孔吗，如果有做，可以对照NTC组和加了模板的组，溶解峰还是一样的话，那你扩出来的产物100%是引物了。
再有，你的扩增曲线问题，CT太了，一般做定量认为CT=25时，是一个模板扩出来的，所以当大于25扩出来的结果都不可信。
还有，你反转录的时候RNA加多少，2微克？，反转录体系是多少,20微升？反转录之后按照多少比例稀释，1比4？
总之，问题可以再问详细一点，也可以直接HI我
如果做过NTC那溶解峰就没问题了，而且都很单一，特异性蛮好的。没稀释的cDNA做的定量，CT大于30？你P的什么基因呢，表达量也太低了吧，内参的CT呢，也是这么低吗
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