紫外-可见分光光度法测定人血白蛋白中的色氨酸含量

　　本法系用紫外-可见分光光度法（通则0401吸收系数法）测定人血白蛋白供试品中的N-乙酰-DL-色氨酸含量。

　　测定法

　　用0.85%～0.90%氯化钠溶液将供试品蛋白质稀释至5%，即为供试品溶液。量取供试品溶液0.1ml，分别加入0.85%～0.90%氯化钠溶液0.3ml和0.3mol/L高氯酸溶液3.6ml，混匀；另取0.85%～0.90%氯化钠溶液0.4ml，加0.3mol/L高氯酸溶液3.6ml，混匀，作为空白对照。室温放置10分钟，以每分钟3500转离心20分钟，取上清液在波长280nm处测定吸光度，用空白溶液调零点。按下式计算供试品中的N-乙酰-DL-色氨酸含量：

　　式中

　　n为供试品的稀释系数；

　　5.25为N-乙酰-DL-色氨酸的毫摩尔吸收系数；

　　P为供试品的蛋白质含量，g/L。