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细菌赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶(LYS-GINGIPAIN)活性比色法

2021.8.29

主要用途

 

  细菌赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶(LYS-GINGIPAIN)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过单肽化合物底物acetyl-Lys-pNA,受到赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的水解,释放出黄色对硝基苯胺,即采用比色法来测定样品中酶活性的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种牙周炎细菌裂解萃取液、培养上清、牙周缝隙液体等样品赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的特异活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

 

牙龈卟啉菌蛋白酶(gingipain)是一种胰蛋白酶类半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteinase),常见于细菌表面、细胞外基质囊泡内以及细菌培养上清,为膜结合型和细胞外分泌型,有2个类型:精氨酸依赖特异性(arginine specific;Rgp)和赖氨酸依赖特异性(lysine specific;Kgp)。前者有2个同工酶:RgpA和RgpB:RgpA又分成HRgpA、RgpA(cat)和mtRgpA;RgpB又分成RgpB和mtRgpB。牙龈卟啉菌蛋白酶也是一种毒力因子,为革兰氏阴性厌氧细菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)、等多种细菌生长提供营养,使血液凝结和纤维溶解(fibrinolytic)通路,以及免疫系统失调,激活激肽释放酶(kallikerin)和激肽(kinin)通路,调节宿主细胞因子网络,活化基质金属蛋白酶和血小板,切离层粘连蛋白(laminin)、纤连蛋白(fibronectin)、胶原蛋白等,间接促成牙周组织浸入和破坏,诱导细胞凋亡、CAM分子分解和细胞脱离(失巢凋亡anoikis),导致牙周病发生,甚至心血管疾病、风湿性关节炎和阿茨罕默症等。牙龈卟啉菌蛋白酶成为药物靶标。基于人工合成的单肽化合物底物acetyl-Lys-p-Nitroaniline;乙酰赖氨酰对硝基苯胺),受到赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的水解,释放出黄色对硝基苯胺(405nm 波长),来定量测定赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的特异活性。赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶反应系统为:


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