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ATS声波移液原理及应用案例(二)

2020.6.01

2.高通量定量PCR: 自动化,微体系,极低的CV

定量PCR(qPCR)被广泛应用于基因表达分析,基因分型,SNP分析等应用。目前定量PCR常用的反应体系为10ul-20ul,采用ATS声波移液技术可进行1ul 甚至更小反应体系定量PCR。ATS进行cDNA, Mix buffer,引物,荧光试剂的纳升级移液,整个过程无需枪头,没有交叉污染,且CV极低。Broad Institute of MIT and Harvard的科学家采用ATS与Roche LightCycler® 1536 定量PCR仪联用,实现基于定量PCR 的高通量药物筛选[1]。ATS也可与机械臂联用,实现24小时无人值守高通量药物筛选(如图5)。

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图5:ATS自动化药物筛选平台

3. 蛋白结晶:高通量,微体系蛋白结晶;减少种晶基质效应,提高结晶成功率

蛋白结晶过程可分为3个阶段成核,生长和停止生长。晶核的形成是蛋白质晶体生长的起点和关键点,通过种晶可提高结晶的成功率。种晶过程,会引入外加缓存液对于结晶条件的影响,Roche的科学家首次把声波移液技术应用到高通量的蛋白结晶的条件筛选。他们通过ATS降低种晶的体积到15nl,减少缓冲液对于结晶环境的影响[2]

如图6所示蓝色柱状图为ATS进行种晶,橙色,黄色柱状图为没有种晶的对照组。统计了6种蛋白样品,每种蛋白96个液滴中结晶液滴的个数。在另一篇文章中[3],Roche的科学家采用ATS进行蛋白溶液和各种结晶试剂的转移,实现30nl体系结晶(如图7)和高通量的结晶条件筛选。

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图6:ATS种晶结晶数据

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图7:基于ATS移液的溶菌酶30nl 体系结晶


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