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糖化血红蛋白(HbA1c)的检测方法-乳胶凝集反应法

2022.2.13

  乳胶凝集反应法是利用糖化血红蛋白(HbA1c)抗原与HbA1c抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白(HbA1c)的百分含量。目前国内外几家厂商可以提供HbA1c测定的试剂盒。这种免疫反应是由被测血样品种的总Hb和HbA1c与试剂中的HbA1c抗体结合而形成凝集,凝集量随HbA1c蛋白浓度的大小而变化。用生物分析仪器来进行比浊测定HbA1c抗原的浓度,采用终点法,生化仪通过测定反应液的吸光度值,可直接反映出凝集量的多少;推算出HbA1c占Hb的百分含量,测定时,仪器多采用660nm单色光做主波长,800nm单色光做副波长,通过标准曲线得出实测值。由于这种试验其标准曲线是非线性的,所以在测定前,首先用随试剂盒一起带有的5种不同浓度的定标液,做出5点非线性标准曲线。曲线和数值存在生化仪的贮存器中,测定样品时,实测出的吸光度值A与标准曲线比较,由仪器CPU求出实测样品中的HbA1c百分含量。乳胶凝集反应法测定HbA1c方便、不用增加仪器,可直接用自动生化分析对样品进行快速测定。该方法也可以用手工的方法,在酶标仪进行测定,是目前使用较多的方法。但乳胶凝集反应法其准确性和重复性均有欠缺。

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