RT-PCR之外的新冠肺炎诊断方法 — 恒温荧光检测&胶体金法检测
COVID-19彩色显微镜图像
目前关于新冠肺炎的检测方法主要以核酸检测为主,而核酸检测主要为传统的荧光定量PCR方法,需要进行反转录、荧光定量等操作步骤,操作过程繁琐,且有出现检测结果假阴性的概率。而在针对保证灵敏度和特异性的基础上,关于新冠病毒的核酸检测技术也在进一步优化。
恒温扩增
恒温荧光检测技术作为新一代的核酸扩增检测技术应用于新型冠状病毒的检测,其主要原理是利用反应体系在一特定温度下在引物的作用下进行核酸扩增,最后以荧光作为扩增信号被荧光检测仪器实时捕获,从而实现反映扩增循环情况。由于其检测时间相对于传统的RT-PCR较短,并且对扩增所需要的仪器要求大大简化,且具有较高的特性性以及灵敏度,因此成为核酸检测新冠病毒的另一分子诊断热点。
虽然目前恒温检测技术能够做到即时检测,一般通过简易仪器在30分钟内即可确定测试对象是否感染了新型冠状病毒,并且对检测环境的要求也大大降低。但主要由于工厂产能、原材料供给、运输以及审批程序等原因,目前针对于恒温荧光检测新冠病毒的试剂盒仅有成都博奥晶芯生物科技有限公司一家通过国家药监局新型冠状病毒应急医疗器械审批。
胶体金法
这种胶体金法检测新型冠状病毒的抗体包括IgM/IgG抗体。IgM是一种免疫球蛋白,是机体初次免疫应答中最早出现的特异性抗体,血清中检出IgM抗体表示新近发生感染,IgG抗体阳性则表示感染时间较长或既往感染,此类方法可以用于感染的早期诊断,判断疑似者是否存在此类感染,不仅有操作简单的胶体金法,对于大批量的检测筛查,也可采用酶联免疫法,为大规模的筛查提供了重要的技术支撑。
那么抗体检测试剂盒既方便又高效,是否可以替代核酸检测试剂盒呢? 丹娜(天津)生物科技有限公司首席科学家周泽奇接受科技日报记者采访时表明,核酸检测试剂需要有专门的仪器以及标准的分子检测实验室,并且由于采样的局限性和稳定性、人工操作误差以及试剂盒稳定性等原因,常常会导致PCR结果出现假阴性甚至漏检,从而使得核酸检测的灵敏度降低。
相比较之下,抗体检测方法存在多方面的优势,例如即时检测,可以满足临床科室及床旁检测,操作简单方便,检测结果显示快速,可以显著提高检测效率。此外,对于这种单人份的试剂条可以避免样本间的交叉污染,同时血清检测也可降低医护人员的暴露风险。虽然抗体检测有诸多优点,但对于目前来说,抗体检测试剂盒不能完全替代核酸检测试剂盒,这主要是由于对于一些免疫功能低下的病人,其产生抗体的能力较弱,导致抗体量较低,容易对检测结果造成假阴性,因此抗体检测试剂盒应与核酸检测试剂盒相互补充,只有联合检测才能提高筛查排查率。
就像中国工程院院士、清华大学生物医学工程系教授程京所说的那样,面对病毒威胁,要冷静考虑我们有何种武器,并科学合理进行组合应用,千万别认为哪个武器可以包打天下。
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