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Lonza 4D-Nucleofector电转百科指南：如何提高电转染效率？
在之前的“电转知识”文章中，我们已经了解了转染技术的起源与发展，包括各类转染方式的优缺点：
以及在电转方法中，Lonza 4D Nucleofector™平台所能提供的设备型号：
Nucleofection™ 核转--5步简单的操作方案，实现轻松电转
那么选择电转方法后，该如何提高电转染效率呢？Lonza电转技术专家为大家总结了以下八点：
1
准备好加了新鲜培养基的多孔板，并在实验前于37°C下预平衡
2
使用传代次数少并具有推荐融合度或密度（对数生长期）的细胞
3
针对于贴壁细胞，需限制胰蛋白酶暴露时间，仔细监测细胞分离情况
4
根据优化方案进行细胞计数并使用适量细胞数；所用细胞过少可能导致细胞死亡率增加，所用细胞过多可能导致细胞电转效率降低
5
采用高质量DNA，使用内毒素去除试剂盒进行纯化；请通过测定A260:A280比值检查各质粒制备液的纯度
6
室温下以离心速度80-100×g和方案规定的时间进行离心
7
离心后加入Nucleofector™溶液，混匀溶液/细胞沉淀制备成单细胞悬液，避免对细胞沉淀进行额外操作或用移液器枪头重复抽吸
8
Nucleofection™核转后，用核转试剂盒内配的一次性移液管在电转耗材中的细胞顶部加入约500μL预热培养基
轻轻将一次性移液管吸头置于电转耗材底部，收集细胞
将细胞悬液轻轻接种至制备的多孔板中
请勿重复吹吸混合细胞
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