泛素化质谱检测结果不会看怎么办？

2017.11.20

泛素化质谱检测结果不会看怎么办？不用怕，今天的小课堂时间就来告诉你该怎么看~

泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰，修饰原理是在一系列酶的作用下，泛素的羧基末端与靶蛋白上的Lys残基的ε-氨基之间形成氨基异肽键而将泛素转移到靶蛋白上，并形成-GGR...这样的一个分支链。因为这种泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物体内80%~85%的蛋白质降解，所以称为目前的研究热点。通常泛素化修饰的链有以下特征(图一)：

图一泛素化修饰特征

由于翻译后修饰的蛋白质在生物样本中普遍具有含量低、动态范围广，所以如果仅通过酶切，不进行特殊处理的话，泛素化稀释被鉴定到的机会大大降低。所以一般如果通过质谱方法进行泛素化修饰鉴定时，一般推荐进行富集分析，提高泛素化的蛋白或者肽段水平。中科新生命主要应用抗体对泛素化肽段进行富集，其主要流程是首先是对泛素化的蛋白进行胰酶消化，因为胰酶的识别位点是K和R，所以在赖氨酸的修饰侧链上会产生两个甘氨酸的残基(K-GG)。利用CST公司提供的针对该残基的试剂盒对泛素化肽段进行特异性的富集。不懂的童鞋可以看如下流程如下：