分享至
色谱分析小技巧 | 何为柱效测试三步曲？
柱效，是色谱柱性能的重要指标之一。一根性能良好的色谱柱，往往是做好分离分析的前提。
在新色谱柱开始使用前，测定柱效可以确认该色谱柱是否是合格产品；在实验开始前，测试柱效可以保证实验顺利开展；在实验过程中出现异常时，柱效测试结果将节约问题排查时间。
那么您知道沃特世色谱柱出厂柱效及柱效测试方法如何快速查找吗？柱效测试有哪些关键因素需要特别注意？柱效又该如何计算？今天小编就这三方面为您一一阐述。
一
柱效及柱效测试方法的查找
带有eCord的色谱柱：可以贴近沃特世UPLC仪器柱温箱右侧（如下图位置），并在控制台 — 色谱柱 — 色谱柱QC界面直接读取COA测试报告；
不带eCord的色谱柱：可在沃特世官网按照如下方式查询。
按照提示输入以上信息后，您将检索到如下两条结果，请选择色谱柱柱效测试报告，这将显示详细的柱效测试方法及结果。
沃特世反相色谱柱出厂检测时通常以二氢苊作为标准品，在乙腈/水体系中测试。根据二氢苊的理论塔板数、拖尾因子等参数判断色谱柱性能。对于新色谱柱，柱效测试结果在出厂COA数值的70%以上，可认为是合格的产品。
除二氢苊外，也可使用其他中性化合物如甲苯、萘等作为色谱柱性能监测的标准品。建议使用流动相配制相应浓度的标准品溶液，避免溶剂效应。
二
哪些因素会影响柱效测试结果？
1系统死体积（谱带展宽）
从上图可以看到，系统死体积主要包括进样器、色谱柱和检测器。不合适内径及长度的管线将影响系统死体积。鉴于不同仪器系统的死体积不同，不同规格的色谱柱，尤其是UPLC色谱柱，要在与之适配的仪器系统上使用，才能发挥出应有的效果。
2色谱柱的连接
因沃特世主流色谱柱的In-depth长度较其他厂家色谱柱更长一些，在连接色谱柱时管线出来锥箍的长度要大于3.3 mm，才能确保连接时不产生额外的死体积，以免影响柱效测试结果。若色谱柱连接不好，色谱图上通常表现为峰拖尾。
3采样速率
必须确保一个色谱峰上有足够的数据点以便充分地定义峰形，一般需要25-50个数据点，因此UPLC方法中的采样速率建议设置为20 pt/s。
三
Empower数据处理
1安装系统适应性插件
Empower软件需安装系统适应性插件，才可以直接计算理论塔板数及拖尾因子等。查看方法如下：在配置系统中选中项目后，右键点击属性，在启用的项目中查看是否有此插件。
柱效/拖尾因子计算
按照如下步骤逐步操作即可。
若显示的结果是指数形式，可按照以下步骤修改：
以上就是今天干货满满的“三步曲”，希望能为您的柱效测试保驾护航，让色谱柱用得更安心、更放心。
如您对于沃特世色谱柱有其他任何问题，欢迎联系沃特世耗材部客户顾问。
相关阅读：
▼▼▼进入菜单，更多干货等你来取▼▼▼
常用功能介绍：
【售后服务 - 技术支持与报修】：描述具体问题，上传相关图片，即可快速申请技术支持与报修
【售后服务 - 订购咨询】：订购咨询配件，合约、保养、移机等服务
【应用与培训 - 常见故障排查】：最实用的仪器操作及耗材使用时的常见故障排查技巧
【应用与培训 - 课程报名】：快速报名线下应用培训课程，也可定制课程
【耗材中心 - 联系我们】：耗材订购及其他耗材相关内容咨询
