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“这就是为什么我们会买第二台Alstra微波多肽合成仪”
Biotage Initiator+ Alstra™全自动微波多肽合成系统 & Isolera™快速制备色谱客户使用案例分享
安德鲁 贾米森（Andrew Jamieson）博士在格拉斯哥大学（Glasgow）从事多肽合成的研究工作，拥有着几十人的研究团队，他们合成多种复杂多肽分子用于生物化学方面的研究和应用，在他们进行研究工作期间，Biotage® Initiator+ Alstra™全自动微波多肽合成系统给予了非常大的帮助，使得他们在短时间内合成了大量需要测试的潜在活性化合物；同时他们打破了只有HPLC才能纯化多肽的常规思路，使用Biotage独有的生物反相快速色谱技术，完成了绝大多数的多肽样品纯化，节省时间，提高效率。
此次，我们了解了他们团队的研究以及Biotage产品如何在多肽合成流程中发挥作用。
- 您实验室的研究工作主要是在哪方面？
- 化学生物学，多肽化学，特别是化学合成的构象限制多肽，并且我们会研究其在化学生物方向的应用。
- 2014年，什么原因促使您从Biotage购买了一台多肽合成仪呢？
- 其实成本是我们考量的一个很大的因素，在综合对比了多家多肽合成厂家之后，同样全面的功能，Biotage的性价比更高。
- 在使用了两年Alstra之后，您课题研究的需求量越来越大，您又购买了第二台Alstra，当时您还是有其他品牌的选择，是什么让您再一次选择 Alstra呢？
- 回到2010年，当我在莱斯特大学开始独自进行学术研究时，我很喜欢在多肽合成过程中进行加热的想法，那时只有一家公司能提供这种系统，于是我们买了这个系统。一定程度上来说，解决了我们一些问题，但是我们发现其功能上有一些缺陷，质量上也经常出问题。这时候Biotage推出了Initiator+ Alstra 全自动多肽微波合成系统，有别于其他品牌的机器的工作模式，Alstra通过注射器进行全自动样品输送，两种设备都在一起的时候，我们做了对比，发现差别在于样品的传输方式以及机械性能的稳定性。另外那台带有阀门的设备，非常容易堵塞管路，我们的博士研究生们经常需要花费大量的时间去处理这些堵塞问题（取出阀门，清洗之后再装回机器内部），非常繁琐；有时候在合成过程当中堵塞情况也会发生，特别是在进行过夜反应的时候，情况就更加糟糕了。这种问题不仅浪费了非常多的昂贵的多肽合成试剂，同时消耗了大量的人力和物力。而对于Alstra来说，由于其通过注射器进行转移，有效避免了堵塞管路的发生；由于优点明显，最终我们还是选择了Alstra。
- 为什么您需要像Alstra这种类型的产品呢？
- 我们经常会有新的想法和思路，同时我们希望能够尽快的去尝试。通常我们会定期和我们的合作企业进行沟通，他们提出问题，我们帮他们解决；我们需要很快的设计并合成出能有助于解决这个问题的分子；而时间对我们来说，非常宝贵，我们需要在短时间内拿到目标分子，毫无疑问，Alstra符合了我们对这类仪器的所有期待。我们可以合成出很多我们自己设计的分子，而且这些分子的结构都比较复杂，比如环状肽，修饰肽等。另外我们还发现，对于一些困难反应，另一种型号的反应器的效果并不理想，而Alstra拥有更好的表现。
- 您能举出一些Alstra拥有优秀表现的案例吗？
- 目前我们所做的多肽都是通过装订进行构象限制，另外我们也发展了一些其他方法来限制其螺旋产生，这些工作可以在Alstra上面轻松完成。我们还通过Alstra合成了一些拥有二级结构的长链肽。最近我们报道了一个能够和激酶Aurora-A相互作用的新型多肽分子TPX2，这是一个具有43个氨基酸残基的多肽分子，我们需要进行很多前期的开发工作，而通过Alstra合成TPX2，效率大大提高。
- 您还使用了我们的Isolera快速制备色谱，您如何将这些安排在您的实验流程当中的呢？您认为这种设置有什么好处？
- 是的，我们两年前买了一台Isolera快速色谱系统，主要用它来分离一些小分子化合物，而这一系列小分子主要是我们自身合成的一些特种氨基酸。后来我们发现Biotage也会提供各类规格的反相色谱柱，同时呢，学生也会向我抱怨，每一次进行HPLC制备的时候，都需要进行多次进样，操作繁琐，而且消耗大量时间；那为什么不试一试Isolera呢？于是我们进行了尝试，发现了新大陆，我们不应该墨守成规，Isolera完全可以代替很多的多肽纯化工作，如果对于纯度没有特别苛刻的要求的话，为什么不使用 Isolera呢？从一些方面来说，Isolera更有效率，速度更快。他们最希望的就是能够加快速度，在使用HPLC的时候，往往都是好几个人排着队去使用。对于一些多肽纯化工作而言，Isolera或许是个更快的选择。
- 反相Flash过程中，您纯化的分子大小一般是在什么范围？
- 目前我们合成最多的分子大小是在10-15个氨基酸残基之间，使用Isolera进行纯化的最长的多肽大约是具有20个氨基酸残基。当然，我们使用Isolera时间并不长，一旦学生使用之后，一些好的经验会迅速传开，所以我想，随着更多的学生加入到我们课题组，使用Isolera系统纯化多肽会变得更加普遍。
- 您使用Isolera纯化的多肽粗品量大约是多少？
- 正常纯化量都是在100mg左右，我们正在计划将其提升到克级水平。
- 您对于现在的回收率满意吗？
- 是的，最终回收率可与 HPLC 相媲美。
