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沃课堂 | 液相故障排查之【基线噪音问题】
大家在平时液相分析工作中，是否碰到过基线噪音干扰？莫名的基线波动、波浪状噪音或基线漂移等问题？
此次沃课堂为大家总结了液相实验中可能出现的基线噪音问题，以及如何减小和消除噪音。
1.
基线噪音大
流动相中有气体 – 溶剂脱气；
流动池中有气泡 – 在出口处使用0.009”的管路；
色谱柱上的污染物被洗脱 – 平衡系统，直至基线稳定；如样品中有保留非常强的组分，可设置强洗脱程序；
渗漏 – 此时应修复渗漏，重新连接或更换接头；
检测器灯能量低 – 更换灯；
灵敏度太高 – 使用合适的采样频率，调节增益（如ELSD检测器）；
检测器流动池脏 – 清洁流动池；
电噪音 – 除去电噪音的来源：屏蔽电缆，清洁触点；
采样频率设置过大 – 一味追求高采样频率，可能对灵敏度没有任何帮助，同时也会产生比较大的噪音：UV检测器推荐降低采样频率，HPLC推荐1-5HZ，UPLC推荐20HZ。
2.
同步的基线噪音
大多数情况下都是泵引起的，泵头中存在空气 – 将溶剂脱气，并重新灌注泵；
单向阀问题 – 超声清洗单向阀或更换；
柱塞杆断裂 – 更换；
混合问题 – 更换一个体积更大的Mixer，以增加系统体积；
电噪音 – 改变电路，除去来源。
3.
不同步的基线噪音
气泡 — 流动相要脱气；
检测器中有气泡/空气 — 流动相脱气，或在检测器的后面加反压（不适用于RI检测器） ；
渗漏 — 特别是肉眼无法发现的微漏或者泵的内漏，会造成流速的变化和混合比例的变化，从而导致基线噪音，此时应修复渗漏，重新连接或更换接头；
管路堵塞 — 除去堵塞，冲洗系统；
电噪音 — 除去来源，改变电路。
4.
基线漂移：上漂或者下漂
梯度变化引起，如溶剂B的吸收值高于溶剂A – 使用基线差减，或尝试新的流动相；
化合物从色谱柱上洗脱 – 平衡系统，直至基线稳定；如样品中有保留非常强的组分，可设置强洗脱程序；
溶剂改变（气体吸附，蒸发） – 氦气脱气，隔离溶剂；
溶剂渗漏 – 拧紧或者更换接头；
检测器温度影响（尤其是示差，电化学以及电导检测器） – 流动池温度调节；
柱温波动 – 等待柱温平稳，使用柱预加热器；
压力变化 – 过滤溶剂以及样品，或样品太粘稠；
混合问题 – 更换一个体积更大的Mixer，以增加系统体积。
5.
Cyclic基线
温度影响 – 隔离热源，或搬离临近的通风口，或增加流动池温度；
混合问题 – 更换一个体积更大的Mixer，以增加系统体积；
流动相中的气体 – 溶剂脱气；
泵不稳定 – 检查维修泵；
管路堵塞 – 冲洗系统，排除并除去堵塞源头；
电问题 – 改变电路，或除去根源。
6.
基线上的毛刺
气泡 – 溶剂脱气，并重新灌注泵，流动相脱气越好，基线就会越好；
信号连接不好，连线变松 – 清洁并拧紧检测器上的导线，或检查连线是否有损坏，或更换铲形接线片；
灯继电器试图点燃熄灭的灯 – 更换灯；
电噪音 – 更换电路，或除去根源。
7.小结
确保无电源及电噪音干扰；
为避免基线噪音，确保仪器系统内无气泡或空气，流动相首选过滤脱气；排尽管路、进样器、检测池中的气泡；选择合适的接头和管路，防止渗漏；
在编辑方法时，针对HPLC和UPLC仪器UV检测器设置合适的采样频率，HPLC推荐1-5HZ，UPLC推荐20HZ；
保持良好的操作习惯，如UPLC仪器水相流动相每天更换，添加了缓冲盐的流动相过0.2 μm溶剂过滤膜等，都会减小基线噪音的产生。
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液质联用常见故障之【灵敏度下降】
常见液相故障排查之【压力波动篇】
