SCIEX GQ 第二期 | 捕捉检测信号而不是噪声

SCIEX

2019.10.31

SCIEX公司诞生于1970年,2020年是SCIEX成立50周年.为庆祝“50周年”,我们将策划一系列有趣的栏目和活动.《定量的一代》(Generation Quant,简称GQ)系列互动栏目,将连载4期,为您阐释为什么要定量？和“定量”的四个关键词：灵敏度,选择性,重现性和稳定性.

GQ是一个有趣的互动栏目，我们会在每期连载栏目中提1个问题，只要您正确回答问题就可以获得纪念品一份；您还可以在问卷中针对GQ栏目内容提问，我们会汇总4期节目中收集到所有问题，然后请SCIEX中国高级产品经理赵贵平挑2个问题来进行1对1回答，而被选中问题的提问者会获得有趣的《海错图笔记(壹)和(贰)》两册。立即参与请至文末或点击“阅读原文”。

选择性

强大的选择性使得目标化合物不会被意想不到的干扰所掩盖：

● 你可以分离和识别背景或内源性干扰

● 你可以区分同分异构化合物

● 你可以简化方法的开发，只关注已知的目标

● 你可以充满信心的识别一系列孤立的色谱峰（基于一个综合质谱数据库）

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捕捉检测信号而不是噪声

提高分析方法的特异性和选择性

你的液相色谱-质谱(LC-MS)分析方法能很好地从样品中识别目标化合物。标准品溶解在纯溶液中可以做出漂亮的分析，但是在真实的样品中，检测分析物的却大不相同。共流出物、背景干扰和其他基质效应都会严重降低检测能力。那么，什么样的分析技术可以提高选择性？

基于三重四极质谱仪的多反应监测(MRM)模式监测分析物的碎片离子，是用于目标分析物检测和定量的最常用方法。与单独监测完整的分析物相比，MRM实验通过增加二级碎片离子的特异性，大大减少了干扰。但有时即使使用MRM，污染物仍然会出现，特别是在更复杂的样品中，共流出物、同分异构体也会干扰MRM对目标分析物的检测。这些干扰可以通过额外的样品制备策略来消除，但这通常会给检测增加繁琐的步骤。

你的三重四级杆质谱系统是否有一个可以提供第三个层次的特异性方案呢? SCIEX QTRAP^® 系统实际上是三重四极杆质谱系统，但是增加了离子捕获功能。第三个四极杆可以作为线性离子阱。当你的实验面临共流出物等的检测挑战时，您可以选择MRM³分析策略。MRM³是基于母离子—子离子—孙离子的检测模式和定量策略。当背景和干扰信号很高时，使MRM策略变得困难时，MRM³使分析物的高灵敏度定量成为可能。通过去除基质干扰，MRM³可以显著提高检测限(LOD)和定量限(LOQ)。除了MRM³功能外，QTRAP系统还可以为采集过程中的每个MRM的相应母离子提供全扫描的高灵敏度MS/MS数据。通过在一次进样分析中获取MRM定量数据和MS/MS定性数据，可以同时对化合物进行定量和鉴定，从而给出准确可靠的结果。

提高选择性的另一种方案是提高MRM实验的分辨率。在一定程度上QTRAP可能实现增强分辨扫描，提高了QTRAP仪器的分辨率。但对于真正的高分辨率，MRM^HR可以在SCIEX QTOF X500和TripleTOF^®高分辨质谱系统上完成。通常，高分辨率仪器必须牺牲灵敏度，以产生足够快的扫描速度，提供良好的定量结果。扫描速度非常重要，因为液相色谱峰的扫描点数足够多，才可以确保良好的定量结果。基于SCIEX QTOF X500和TripleTOF系统，可以在不牺牲灵敏度的情况下以高分辨率和快速扫描速度策略下获得MS/MS质谱图。根据MS/MS数据获取的子离子信息，可构建 MRM^HR进行定量分析。MRM^HR可以通过降低干扰的影响来提供更好的选择性。由于能连续获取MS/MS数据，因此可通过子离子选择定量，从而简化了测定过程。

通过可编程的Scheduled MRM^™策略，质谱系统仅在LC洗脱窗口附近为每个分析物获取数据。这会极大减少错误，并改善了定量结果，提高了总体的特异性、准确性和可靠性。Scheduled MRM 策略对于非常复杂样品及方法特别有用，可以在一次进样分析中检测数千个MRM离子对。

SelexION^®DMS(differential mobility separation)差分迁移分离是一种基于气相迁移分离的技术。SelexION装置安装和拆卸简单，用户不需要打破真空。利用SelexION技术，可以解决共流物的分离、降低背景基质干扰，极大提高数据质量。此外，由于SelexION装置提供了额外的分离特性和选择性，样品制备可以极大简化。

由于各种原因，往往被忽视的选择是使用毛细管电泳分离策略，而不是基于液相色谱的分离策略。毛细管电泳电喷雾电离质谱(CESI-MS)能够在降低离子抑制的同时，实现高分辨率的分离，提高灵敏度。CESI-MS已被证明对离子化合物和极性代谢物和降解产物(如阴离子和/或亲水性分析物)特别有用，如聚糖类、蛋白变体和多肽的翻译后修饰，比如具有多个磷酸化位点，完整和天然的蛋白质构象和相互作用。

在特异性和选择性方面，SCIEX创新的工作流程和技术为您的检测提供了多种选择。高特异性和选择性确保你的目标化合物不会受到意外干扰的污染。

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问题2：为了提高分析方法的特异性和选择性，SCIEX创新的工作流程和技术为您的检测提供了多种选择，包括但不仅限于(多选题，尽量多选的意思)

A. SCIEX QTRAP^®系统和MRM³分析策略B. SCIEX QTOF X500和TripleTOF^®高分辨质谱系统和MRM^HR分析策略C. SelexION^® DMS(differential mobility separation) 差分迁移分离技术D. 毛细管电泳电喷雾电离质谱(CESI-MS)

有趣的《海错图笔记(壹)和(贰)》两册

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