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ELISA 数据处理很难吗？那你没选对方法！

美谷分子仪器

2019.3.15

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源自美国

专业的生物分析仪器公司

ELISA

是酶标仪最常见的实验应用之一

简单、快速、灵敏且价格低廉

而在进行 ELISA 的数据处理的时候

标曲绘制、参数计算、结果处理等

却会比较繁琐复杂

那么是否有更方便的处理方式呢？

本期，让我们一起看看

如何在 SoftMax Pro 软件上

进行简单快速的 ELISA 数据处理

*流量预警：38.6 MB。

**视频前半段包含 SoftMax Pro 软件介绍。案例开始请空降 1:44。

“

以实例，手把手教你做 ELISA 数据分析分析

”

最常见，大家也是平时会用到的，就是 ELISA 的数据分析，也就是说，任何需要通过标曲换算未知样本的情况的都适用于这个案例。

那么首先，我会通过 MakeError 和 if 公式来向大家介绍数据的初步处理如果有需求的话，通过这两个键，一个是 reduction，一个是 display。那么其次，也是常见的，曲线的拟合，未知样本的换算，通过 InterpX。最后是一个数据的判断，pass 或者 fail 这种。

好，我们来看一下具体的案例。

我们在这里有一张空的，什么都没有的 ELISA 板，让大家看一下我们的软件是怎么处理数据的。选择 reduction 键，常规呢，大部分时候只要输出一个值就可以了，但是这个时候我们其实可以做非常简单的一个判断的。

选 customer。这个时候给大家看一下，这里有一个公式，我已经编上了。调用两个公式，一个是 if，一个是 makeerror。我这个公式什么意思呢，if 是需要给他一个条件，比如说你输出值大于 0.2 的时候，它输出第一个结果，第一个 outcome，小于等于 0.2 的话它输出第二个结果，第二个结果呢，这里我们用 makeerror 这个代码。在我们的说明书里面有非常详细的每个代码对应什么。Makeerror 呢，它表示的就是超范围。点 OK。

我们在 display 里直接就可以看到，它把超过 0.2 的孔，全部都报错了。

接下来我们回来。上面的操作是对于有需求的。常规的时候呢我们首先是选中要拍的板中的空白孔，点一下 plate blank，均值校零。立马可以看到，直接就校好了。

下面是我们的标准曲线。这里是我们的标准曲线组，我们来添加一个，我们叫 standard（STD）。下面这里一定要选中 standards，对应标准曲线。定义一下他的浓度，比如说我在这里选 pg，点OK。

软件本身其实是不知道你的样品排布的，那么我们这个时候要告诉它，你的标准曲线是怎么排布的。点一下 series。在这个案例中，我是从下向上稀释，然后横坐标设有两个副孔，起始是 1,000 pg，10 倍 10 倍稀释。点 OK。

这个时候标曲就完成了，通过点一下 descriptor，看一下分布范围跟预期是否一致。如果有的时候你们遇到不是这种常规稀释的样本，可以选中自己手改这些数据，都是可以改变的，完成。这个时候我们的一条标曲就完成了，基于这个我们就可以作图。

点一下 new graph，因为你只有一条组，所以 x 轴、y 轴它都帮你预设好了。那么你可以去改，比如说我只输均值啊，或者 values，都可以，点 OK。

这样就出来一条标曲图。像常见的两参数、三参数、四参数、曲线、线性、point-to-point 等，我们都是提供的。在这个案例中，我们使用 log-log，点一下，拟合好了。

拟合好之后，所有的公式、a、b 值都会给你提供的，不需要自己再去计算。

再回到 plate 1，这个时候我们需要一个样品组。点一下 template editor。同样，比如用这两排做一个样品组，我们添加一个组，我们叫它 sample。这个时候一定选 unknown，表示你的未知样本。点 OK。

同样，也是要告诉它你的未知样本怎么排的。设置好后点 OK，这个时候样品组就出来了。

样品组本身会默认带两个公式去换算，但是可以看到这里默认的都报错了，因为它不知道数据源在哪里，就是你的那个曲线源。我们双击它打开。

可以看到我们这个样品是调用一个公式，叫 InterpX 这个公式，这个公式，你给它一条曲线，给它一个 y 值，他就会出 x 值，还有一个类似的公式叫 interpY，由曲线和 x 值求 y 值，都是可以做的。在这里因为它默认的这个标曲是不存在的，所以它报红，那么非常简单，我们只要改一下这一段就行了。在输入的时候大家尽量不要自己手打，可以点一下这个 helper，那么你每打一个单词，都会有一个提示出现，会比较方便。这个曲线其实叫 plot1，选中就好了，点下 OK。

可以看到根据标曲，未知样品的浓度就出来了，平均浓度也出来了，std Dev、CV 值也都出来了。

这个时候我们加一个非常简单的判断。以 meanresult 为例，我们先改一个名字，比如说叫 pass fail。我们目前想要完成一个什么样的判断呢，就是在 1-1000 范围内的样品，显示 pass，在这个范围外，我们称呼为 fail。同样通过 if 语句实现，条件处可以通过 and 来添加一个条件，就是说同时要满足这两个两个条件才成立，第一个结果，选择 pass。可以通过加双引号，来输出一个文本。那么如果不满足这个条件呢，就是在大于等于 1000 或小于等于 1 的情况下，我们输出 fail。这里 check 一下，没有问题，点 OK。

这样一个关于数据简单的判定就可以完成了。那么这只是一轮的 if 语句，我们的软件也可以做到大 if 套小 if，可以做到非常复杂的判断。