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接触霉变玉米竟导致肺部长满黄曲霉菌，该如何安全高效的检测玉米中黄曲霉毒素？

莱伯泰科

2021.12.10

农忙时节回乡收玉米，事后经连续一月咳喘不止，最终发现真凶竟是黄曲毒霉菌！！！

近日，一条女子肺部长满黄曲霉菌的新闻冲上热搜，该女子经过医生检查判断出为黄曲毒霉菌导致肺部感染，起因竟是农忙期间回家帮忙收割玉米导致。

这时候不断有小伙伴提出疑问，什么是黄曲毒霉菌？我们平时吃的玉米以及其他食物是否也含有黄曲毒霉菌？

致使本次事件的元凶是黄曲毒霉菌，而黄曲毒霉菌会产生黄曲毒霉素，黄曲毒霉素是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。在日常生活中，不要吃霉变的食物，尤其是发霉的玉米、花生、干果等。同时在收取玉米、花生等农作物的过程中要注意环境的通风，尽量站在上风口，同时做好个人防护（如戴密闭性较好的口罩），尤其是在雨水较多的天气下尤其要注意。

那么如何更安全更高效的鉴别食物中是否含有黄曲毒霉素呢，为此莱伯泰科针对食物中黄曲毒霉素的检验建立了玉米中黄曲毒霉素B族的检测方法，供大家参考。

前言

黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。

黄曲霉毒素B1存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热，280℃才可裂解，故一般烹调加工温度下难以破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。

本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的粮谷中黄曲霉毒素B族检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B族的净化，并用液相荧光检测器进行检测，黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

关键词：SPE1000 粮谷黄曲霉毒素 GB 5009.22-2016

一、仪器设备及试剂

（一）仪器设备

SPE 1000全自动固相萃取系统，莱伯泰科公司；

LC600 二元高压梯度高效液相色谱：配有荧光检测器（莱伯泰科公司）；

黄曲霉毒素免疫亲和柱（月旭 1mL）

（二）试剂

甲醇，乙腈（色谱纯 FISHER Chemical）；

超纯水；

黄曲霉毒素B族标准储备液：黄曲霉毒素B1和B2（10ug/mL），甲醇；

黄曲霉毒素B族标准工作液：取10μL的标准储备液于10mL的容量瓶中，用甲醇定容，得到浓度为10ng/mL的标准工作液。

二、实验过程

（一）样品预处理

称取5g玉米试样(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入20.0mL甲醇-水溶液(70+30)，涡旋混匀，用均质器10000r/min上下震荡均质3 min，在6000r/min下离心20min。准确移取4mL上述上清液，加入10mL超纯水，混匀，待净化。

（二）加标样品

在2.1的待净化液中加入50μL的10ng/mL黄曲霉毒素标准工作液，样品的加标浓度为0.5ng/g。

（三）SPE净化

按照图1所示的方法进行固相萃取方法编辑，加载并运行方法，SPE1000进行2.1或2.2中样品的SPE萃取过程。

收集样品到收集瓶中，用超纯水定容到1.0mL，用0.22μm滤膜过滤，待检测。

图1 黄曲霉毒素净化的固相萃取方法

（四）高效液相色谱-荧光检测条件

色谱柱：C18，柱长150mm，内径4.6mm，粒径5μm，或性能相当者；

流动相：超纯水：甲醇+乙腈（50+50）=68:32；

流速：1.0mL/min；

柱后衍生：光衍生；

荧光检测器：激发波长360nm，发射波长440nm；

柱温：40℃；

进样量：20μL。

三、实验结果

（一）黄曲霉毒素B族标样液相色谱图

图2为0.5ng/mL的黄曲霉毒素B族标样的液相色谱图。

图2 0.5ng/mL的黄曲霉毒素B族标样液相色谱图

（二）空白样品色谱图

图3为空白样品的色谱图，在黄曲霉毒素B1和B2的出峰时间处没有峰，说明该样品中没有黄曲霉毒素B1和B2检出。

图3 空白样品色谱图

（三）加标样品色谱图

图4为加标样品的色谱图。

图4 加标样品色谱图

（四）加标回收率结果

表1为加标回收率结果，4个平行样黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。

表1 加标回收率结果

四、结果与讨论

本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的食品中黄曲霉毒素B1和B2检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B1和B2的固相萃取，并用液相荧光检测器进行检测，方法的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

参考标准

1、GB 5009.22-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定

关于莱伯泰科

北京莱伯泰科仪器股份有限公司（股票代码：688056.SH）成立于2002年，是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。公司自成立之初便专注于科学仪器设备的研发，立志为环境检测、食品安全、医疗卫生、疾病控制、材料研究等众多基础科学及行业应用提供实用可靠的实验室设备和整体解决方案。公司发展至今已拥有各类专利及软件著作权100余项，持续通过高新技术企业认证，连续多年被业内媒体评为中国仪器仪表行业“最具影响力企业”，是全球范围内能将多种类和多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。

公司拥有LabTech、CDS、Empore等行业知名品牌，在中国和美国设有研发和生产基地，并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。公司产品服务涵盖实验室分析仪器、样品前处理仪器、实验室设备、医疗设备、实验室耗材和实验室工程建设等，可为全球多种类型用户提供从实验室建设到样品分析的一站式解决方案。目前，公司产品已销往全球90多个国家和地区，累计服务客户3万余家。

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