Premier SEC耐用性案例分享
在抗体药物分析技术中,SEC是用量最大的消耗品之一,因此市场高度关注SEC的耐用性。沃特世的Premier SEC采用经典BEH填料,其耐受SEC流动相的能力得到了市场的充分肯定,但不同类型的样品、剂型,对寿命是否会有影响?在Premier SEC上市之际,我们专门设计了一个考察实验,通过四个商品化单抗制剂的检测,验证其对辅料的耐受能力。借本期推文,我们分享具体实验内容,期待对您日常分析有实际的帮助。
色谱柱:Premier SEC(186009962,2.5 μm,7.8x300 mm;186009964,1.7 μm,4.6x300 mm)
流动相:DPBS(pH=7.4), ~150 mM氯化钠
样品:四种抗体药物的信息如下表所述
表1. 样品信息表
每根色谱柱,四个样品轮流进样,且每隔100针进行柱效对比,发现在500针时,每个抗体的分离性能都跟新色谱柱完全一致,即便是要求最苛刻的贝伐珠片段,分离度也没有明显下降。各色谱柱评估谱图如下:
图1. XBridge SEC耐用性考察色谱图。
图2. ACQUITY SEC耐用性考察色谱图。
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Premier SEC对碱性流动相有良好的耐受性,寿命不受SEC流动相影响;
吐温等辅料不会明显降低Premier SEC寿命,可耐受500针以上的进样检测,测试过程中可以改变流速,改变分析样品类型;
流动相用0.1 μm的滤膜过滤,对提高SEC寿命可能有更好的帮助;
更复杂的样品可以增加保护柱,以进一步提高Premier SEC寿命。
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