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精彩回放及答疑 | 全方位解读细胞治疗从早期研发到生产质控中的痛点及方案
近年来随着人类对肿瘤疾病认识的不断加深，精准医疗的必要性与迫切性已经得到了各国政府、科学界和医疗界的广泛重视，进而也带动了细胞/基因疗法（CGT，Cellular/Gene Therapy）市场的蓬勃发展。
2022年5月24日，由安捷伦主办、医麦客承办的“安捷伦细胞与基因治疗系列网络研讨会-第二期：细胞治疗从早期研发到生产质控的线上直播课程。此次课程邀请到了安捷伦诊断与基因组学事业部大中华区高级市场经理 黄妤、安捷伦细胞分析事业部 PLXA 应用工程师经理 王颖、安捷伦细胞分析事业部 BioTek 应用专员 李康、安捷伦细胞分析事业部 PLXF 产品专员 王捷思，为大家分享安捷伦创新技术在细胞与基因治疗领域的应用详解。助力中国医药产业人才成长。对于本期直播中，各位听众关心的 Q&A，下文小编进行了整理。您也可以点击文末图片，收看整场直播回放。
Q & A 安捷伦细胞治疗的CRISPR解决方案
Q
1.OLS 中同一个文库的 DNA 长度能不同吗？比如既有150nt 也有180nt长度的 oligo ？
A
可以的，安捷伦合成的 OLS 文库非常灵活。从30到230nt的长度。同一个文库中的 oligo 的序列长度可以不同。
Q
2.sgRNA 的修饰在中国申请专利了吗？
A
申请了，2021 年，sgRNA 的修饰在中国的专利已经获批。
Q
3.sgRNA 的编辑效率会有多少？修饰之后能够提升多少？
A
sgRNA 编辑效率的影响因素比较多，例如 sgRNA 的纯度、sgRNA 的序列特征、包括有无修饰等等。没有一个固定的值或者范围。对 sgRNA 的修饰是提高编辑效率的一个利器。例如刚才讲到进行 M 或 MS 修饰后，部分基因的基因插入的编辑效率可以从 0 提高到 20%，也有的可以从0%提高到接近 50%；基因敲除的效率，有的基因从 20% 提高到 60%，有的则提高到 90%。
Q & A 从研发到质控，xCELLigence 与 NovoCyte 如何助力细胞治疗
Q
1.RTCA 扫描一块96孔板多久呢？
A
RTCA 分为不同的型号，有检测 16 孔板， 96孔板的型号，检测一块96 孔板15s，高端机型 RTCA eSight 用阻抗法检测一块 96 孔板需要 3s，成像检测一块 96 孔板需要 6-7min，且成像检测时间与拍照数量、曝光时间等设置相关。
Q
2.RTCA 检测杀伤可以测多久？上清是否还可以用于细胞因子检测？
A
RTCA 检测时长没有严格限制，根据不同的实验需求可自定义。细胞治疗产品前期研发筛选时可以测几天，甚至十几天，在质量控制 QC 环节，可以测几小时、24 小时等。RTCA 阻抗法做检测不需要加染料，这样就不会有底物干扰，这样上清可以直接用于细胞因子检测。
Q
3.RTCA 检测杀伤可以实时动态成像使杀伤过程可视化吗？
A
RTCA eSight 是阻抗检查与成像检测相结合的仪器，可以进行实时拍照，评估杀伤效率的同时使杀伤过程可视化。
Q
4. NovoCyte 流式细胞仪检测残留率是怎么检测的呢？
A
流式细胞仪检测残留率可以使用 CD19、CD16/56 等标记，检测 B 细胞、NK 细胞的残留情况。
Q
5. 安捷伦流式细胞仪流速检测与分析速度是什么样的？
A
安捷伦高端的流式细胞仪具有更快的检测与分析速度，每秒钟可以完成100000 个事件的检测与分析，而且可以配高通量检测的自动加样器，一块 96 孔板可 20min 完成检测，一块 384 孔板可 80min 完成检测，实现无人值守的快速检测。
Q & A 活细胞成像与酶标检测在细胞治疗产品研发及质控中的关键作用
Q
1.活细胞成像最长可以做多久？
A
仪器本身可以完成最长一周的动力学实验；通过搭配智能孵育箱 BioSpa，仪器可以实现长达数周实时监测细胞。
Q
2. 仪器对耗材有限制吗？特殊样品如悬浮细胞可以拍摄吗？
A
没有限制，耗材是开放的，支持 6-1536 孔板、各式培养皿、玻片腔室玻片及 T25、T75 培养瓶等；对于血液瘤研究常用到的悬浮细胞，我们利用孔模式及慢速进板功能动态捕获，实时记录一段时间内悬浮细胞的动态变化。
Q
3. 除了细胞治疗外，Cytation 系列还有哪些应用？
A
Cytation 系列专注于细胞学相关领域的成像，如细胞增殖、凋亡、坏死、侵袭、吞噬等，并以此延伸至亚细胞层面以及组织层面成像，如线粒体代谢、膜受体结合、外泌体分泌、免疫组化、HE 染色等；同时我们积累了各个方向的应用方案，如类器官解决方案、微生物解决方案、抗病毒药物开发解决方案等。
Q & A Seahorse用于生物制药 CMC 和生产过程中的细胞代谢功能分析和质控
Q
1.线粒体备用呼吸能力指什么，有何意义？
A
线粒体备用呼吸能力是 Seahorse XF 细胞线粒体压力测试里得到的一个参数，是最大呼吸与基础呼吸的差值，衡量细胞对能量需求增加或压力的反应能力。
Q
2. Seahorse 测糖酵解与乳酸测定有何区别？
A
Seahorse 通过测量细胞外酸化速率检测糖酵解。Seahorse XF 糖酵解速率测定可计算并扣除线粒体产生的酸化以精确测量活细胞糖酵解速率，得到基础糖酵解和线粒体呼吸被抑制后的补偿性糖酵解等参数，揭示瞬时反应和快速代谢转换，获得终点法乳酸测定所不能提供的信息。
Q
3.Seahorse操作简便性如何？
A
Seahorse 操作简便，标准实验操作步骤和试剂盒，软件直观易用，自动计算参数。
点击下方图片，收看第二期完整课程回放
关于安捷伦
安捷伦科技有限公司（纽约证交所：A）是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者，致力于为提高生活质量提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最具挑战性的难题提供更可靠的答案。2021财年，安捷伦营业收入为63.2亿美元，全球员工数约为17,000人。
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