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简单高效利用Lonza Nucleofector电转技术重编程产生 iPSC

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2022.8.03

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诱导多能干细胞 (iPSC) 是通过人工将干细胞特异性转录因子引入预成熟或成熟的体细胞，从已经分化的细胞类型中衍生的多能干细胞。

由于其类似ESC的功能，iPSC已经作为许多发育或疾病相关应用的强大工具，帮助科学家进一步确定发展机制或疾病发病机制，或作为进行体外药物筛选和毒性研究的新型人类疾病模型，并具有成为再生医学新工具的巨大潜力。

科学家通过病毒转导或非病毒转染将干细胞特异性转录因子引入原代体细胞中，可以简单地在实验室中产生诱导的PSC。不同组合中使用的典型重编程因子是Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc，Nanog和Lin28。

最初，这些重编程因子通过逆转录病毒转导递送到体细胞中，因其随机整合的特性和重编程因子的长期存在对肿瘤抑制基因的潜在失活可能引起肿瘤生长，从而降低了它们对临床的适用性。

因此，研究人员通过使用非整合 RNA 病毒或游离型载体甚至 mRNA 的非病毒递送来探索替代方案。龙沙的 Nucleofector™ 技术已被证明是用于 iPSC 生成的一种方便、高效且具有成本效益的非病毒替代品，目前正被世界各地的领先科学家使用。

Nucleofector^™ 技术已被有效地用于重编程常见的细胞类型，如人外周血单核细胞 (PBMC)、真皮成纤维细胞或 CD34+ 造血祖/干细胞，以及更罕见的起始细胞类型，如脂肪干细胞(点击此处浏览)或角质形成细胞(点击此处浏览)。

下面列出的链接和参考资料将提供一些指南，说明使用哪些 Nucleofector^™ Kits 将重编程载体转染到这些常用的细胞类型中。此外，为了设置您的方案，我们的主要细胞类型和相应的优化培养基可用作阳性对照。

Human PBMCs生成IPSC

对照细胞

30hPBMCs(Cat# CC-2702)

细胞特异性

培养基

TheraPEAK^™ X-VIVO 15 media

(Cat# BEBP02-054Q)

Nucleofector

试剂盒

对于4D Nucleofector^™ X 单元

P3 Primary Cell 4D-Nucleofector^™

X Kit(Cat# V4XP-3024)

对于Nucleofector^™ 2b系统

Human T Cell Nucleofector^™ Kit

(Cat# VPA-1002)

参考资料或

方案

案例研究：

Lonza L7^™ hiPSC

Reprogramming and hPSC Culture System

（点击查看）

实验方案\\应用数据\\文献列表：

（点击查看）

Human Fibroblast生成IPSC

对照细胞

30Human Dermal Fibroblasts (Cat# CC-2511)

细胞特异性

培养基

FGM^™-2 Media (Cat# CC-3132)

Nucleofector

试剂盒

对于4D Nucleofector^™ X 单元

P2 Primary Cell 4D-Nucleofector^™ X Kit (Cat# V4XP-2024)

对于Nucleofector^™ 2b系统

Human Dermal Fibroblast Nucleofector^™ Kit (Cat# VPD-1001)

参考资料或

方案

实验方案\\应用数据\\文献列表：

（点击查看）

Human CD34+造血干细胞生成IPSC

对照细胞

Human Bone Marrow CD34+ Cells (Cat# 2M-101C)

Human Cord Blood CD34+ Cells (Cat# 2C-101)

细胞特异性

培养基

TheraPEAK X-VIVO media

Nucleofector

试剂盒

对于4D Nucleofector^™ X 单元

P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-3024)

对于Nucleofector 2b系统

Human CD34+ Cell Nucleofector Kit (Cat# VPA-1003)

参考资料或

方案

案例研究：

Generation of ipsc with cord blood cells with 4D-Nucleofector^™ System

（点击查看）

实验方案\\应用数据\\文献列表：

（点击查看）

Human Bone Marrow Mononuclear Cells生成IPSC

对照细胞

Human Bone Marrow Mononuclear Cells (Cat# 2S-101D)

细胞特异性

培养基

TheraPEAK X-VIVO media

Nucleofector

试剂盒

对于4D Nucleofector X 单元

P3 Primary Cell 4D-Nucleofector^™ X Kit (Cat# V4XP-3024)

参考资料或

方案

实验方案\\应用数据\\文献列表：

（点击查看）

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简单高效利用Lonza Nucleofector电转技术重编程产生 iPSC

周锦帆