氨基酸分析仪检测红曲米酒中的游离氨基酸
摘要
本样品为红曲米粉末,客户需要测得其水溶液中的游离氨基酸含量。使用Biochrom30+全自动氨基酸分析仪对其水溶液中所含的游离氨基酸组成进行分析。结果表明该红曲米粉末水溶液中游离氨基酸总量的浓度为:1.312umol/mL。各氨基酸含量,见附页结果表。
一、样品前处理
1、所用试剂
1.1 Loading Buffer:锂盐系统,pH 2.2
1.2 磺基水杨酸溶液:取50g磺基水杨酸溶于1L纯水中
1.3 乙二胺四乙酸二钠溶液:取10g EDTA-Na溶于1L纯水中
1.4 0.06mol/L 盐酸:取50mL 盐酸加水稀释至10mL,混匀
1.5 17种氨基酸标准品
2、前处理设备
1)分析天平:精度为 0.001g
2)移液枪及枪头
3)0.22um滤膜
4)一次性注射器
5)低范围pH试纸
6)离心机(10000r/min以上)或0.45um的微孔滤膜
3、样品制备(参考NY/T 1975-2010)
称取试样2g-10 g(精确到0. 001g),置于100 mL容量瓶中。充分溶解后,加水至刻度,混匀,放置过夜后吸取上清液(或过滤后吸取滤液)2 mL于10 mL离心管或试管中,准确加人2 mL磺基水杨酸溶液(1.2),混匀,放置1h。准确加入1 mL EDTA- Na溶液(1.3)和1 mL盐酸溶液(1.4),混匀,离心15 min(或用0.45um的微孔滤膜过滤)。吸取上清液(或滤液)1 mL(测定当前pH,若有需要则可加少许的Loading Buffer (1.1),使氨基酸浓度处于仪器最佳检测范围内),移液枪取上述溶液1mL至一次性注射剂,过滤膜,上机待测。
二、分析方法描述(Biochrom 30+)
氨基酸分析仪分析方法参数:
1)色谱柱:Biochrom Li型阳离子交换树脂柱,4.6x20cm
2)分离程序:
3)运行时间:经分析时间+再生时间 168min
4)反应单元温度:135°C。
5)检测波长:570nm、440nm同时检测。
三、样品中氨基酸含量的计算
样品测定液氨基酸的含量按式(1)计算:
Ci = Cs/As × Ai× F ·························· (1)式中:
Ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);
Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);
Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;
As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;
F ———样品稀释倍数。
附、复方氨基酸双肽注射液分析图谱及做样结果
图1.
全自动氨基酸分析仪
由具有50年专业氨基酸分析制造经验的Biochrom公司生产。
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