金纬标检测

蛋白质质谱鉴定流程

关于样品

1D SDS PAGE /2D PAGE gels样品： 
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 以及Silver stain样品均可进行蛋白的鉴定试验；
2. 银染的样品有可能与后续的质谱分析不兼容，我们推荐您使用下面的产品或者实验步骤进行银染实验：
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3. 银染的样品请不要进行脱色处理 

液体样品（In solution format）： 
1. 假如样品中蛋白量＞10ug，我们对样品的缓冲体系没有要求；
2. 假如样品中蛋白量＜10ug，样品准备过程中尽量减少SDS等表面活性剂的使用，并注意降低盐浓度；
3. 提交样品过程中，注意提供样品的缓冲体系和样品中蛋白的预估含量； 

Co-IP样品： 
1. 如果您洗脱的样品需要跑胶，请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可；
2. 如果您直接提交洗脱样品，我们推荐使用HPH EB (0.5 M NH4OH, 0.5 mM EDTA) 缓冲体系进行蛋白洗脱，保证洗脱缓冲体系与后续的质谱实验兼容； 

样品运输：
1. 我们推荐您将样品冻干后进行运输，冻干样品中蛋白非常稳定。
2. 液体样品推荐干冰运输，短途运输冰袋也可以。 

注意事项： 利用质谱进行蛋白样品的鉴定，在样品准备过程中需佩戴手套和头套，尽量避免自身角蛋白（keratin）对样品的污染。