反转录PCR（Reverse transcriptase PCR,RT-PCR）是一种从RNA扩增cDNA拷贝的方法。RT-PCR对于获得与克隆mRNA的5’、3’末端序列和从非常少量的mRNA样品构建大容量的cDNA文库方面都是极为灵敏与通用的方法。此外，RT-PCR还易于鉴定已转录序列是否发生突变及呈现多态性，还可用于测定基因表达的强度。我公司采用二步RT-PCR法，可满足客户不同的实验要求。

服务内容：
1. 以总RNA或mRNA为模板逆转录成cDNA。 
2. PCR扩增看家基因检测cDNA合成的效率。 
3. 目的基因的克隆及测序。

样品要求：
1. 如果提供的材料为总RNA，请提供足量的并且保证纯度的总RNA(浓度500 ng/μl以上，体积20μl以上）。
2. 如果提供的材料为细胞或组织，应保证材料新鲜，动物细胞数为10⁷以上，动物组织为100mg以上。

3. 提供的样品要新鲜并尽可能多，不推荐提供RNA样品，或者提供cDNA，并尽可能详细的提供背景资料（基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等）。

终产品：
实验报告（包括实验方法、照片等）；cDNA；PCR产物。

服务说明：
实验材料必须保证新鲜，请您采样后立即放入液氮中速冻。

基本步骤：
● 模板制备：见RNA提取技术服务。
● 引物合成：客户提供上、下游引物，或者我公司提供免费的引物设计及合成（包括RT-PCR半定量检测中的内参引物）。
● 反转录
（1）Microtube管中配制下列模板RNA/引物混合液，全量<15 μl。

（2）70℃保温5分钟后迅速在冰上急冷2分钟以上。 
（3）离心数秒钟使模板RNA/引物的变性溶液聚集于Microtube管底部。 
（4）在上述Microtube管中配制下列反转录反应液。 

42℃保温1小时。 
（5）70℃保温15分钟后冰上冷却，得到cDNA溶液。
若需要表达，参考基因表达服务。若需要进行RT-PCR半定量分析，接着以下的操作。
● RT-PCR半定量分析
PCR扩增目的基因及看家基因，产物经过琼脂糖凝胶电泳后进行灰度扫描分析。

实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜，请联系嘉美生物。
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中国生命科学实验技术服务、定制高端平台——嘉美生物实验技术中心

嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,***酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司。

RT-PCR实验服务（逆转录PCR实验技术服务）信息由北京嘉美臻元生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于RT-PCR实验服务（逆转录PCR实验技术服务）报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途