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环特生物是中国首家斑马鱼生物技术研究开发企业,专注于药物与大健康产品研发及毒理学评价等领域的技术外包服务,是中国首家通过aaalac国际认证的斑马鱼研发机构,也是国家高新技术企业和国家火炬计划企业。环特生物参与研发的6个创新药物已在申报CFDA临床批件,其中两个已被批准进行临床试验。
多发性硬化症(multiple sclerosis, MS)是以中枢神经系统白质脱髓鞘病变为特点的自身免疫病。尽管目前临床已经有多种MS治疗药物,包括***类、免疫调节类、免疫抑制类、他汀类药物等,但是这些药物对MS的疗效有限,且毒副作用大,费用高,因此迫切需要研发新的MS治疗药物。
动物模型实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis, EAE)的临床表现及病理改变与急性多发性硬化症极其相似,但该模型实验周期长、操作复杂、成本高、特异性不强、重复性差、且无法实现高通量药物筛选的目的。斑马鱼的髓鞘少突胶质细胞的结构特性和细胞谱系关系与哺乳动物具有高度的可比性[1-4]。斑马鱼体内与髓鞘形成相关的基因(如dm20基因,mbp基因和P0基因等)与哺乳动物具有很好的同源性[4],其大约发育到2dpf时大脑内紧凑型髓鞘已经形成 [5]。
方法与结果
环特生物利用活体斑马鱼髓鞘染色技术、整体斑马鱼免疫荧光染色技术和运动神经元荧光斑马鱼建立了斑马鱼多发性硬化症药物筛选与评价体系,有利于早期淘汰,减少不合格候选化合物进入哺乳动物实验,显著降低新药研发风险、缩短新药研发周期、降低新药研发成本,从而加快新药研发的整体进程。方法与结果见技术路线和示范图列。
技术路线
参考文献
[1]Jeserich G, Klempahn K, Pfeiffer M. Features and functions of oligodendrocytes and myelin proteins of lower vertebrate species[J]. Journal of Molecular Neuroscience, 2008, 35(1): 117-126.
[2]Jeserich G, Stratmann A. In vitro differentiation of trout oligoden- drocytes: evidence for an A2B5-positive origin[J]. Developmental Brain Research, 1992, 67(1): 27-35.
[3]Jeserich G, Waehneldt TV. Characterization of antibodies against major fish CNS myelin proteins: immunoblot analysis and immunohistochemicallocalization of 36K and IP2 proteins in trout nerve tissue[J]. Journal of Neuroscience Research, 1986: 15(2): 147-158.
[4]Sivron T, Cohen A, Duvdevani R, et al. Glial response to axonal injury: in vitro manifestation and implication for regeneration[J]. Glia, 1990, 3(4): 267-276.
[5]Brosamle C, Halpern ME. Characterization of myelination in the developing zebrafish[J]. Glia, 2002, 39(1): 47-
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