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PCR芯片实验技术服务

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qPCR Array克服了实时定量PCR检测基因表达工作量大、耗时久的缺点,将基因芯片的检测精度提高到了与实时定量PCR相当的水平。 qPCR Array技术服务主要实验步骤如下: 1 客户样品RNA抽提 a) 若实验对象为组织样品,取适量(50-100mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml的RNA抽提试剂Trizol,匀浆后抽提RNA。 b) 若实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,完全吸去培养液后加1ml的RNA抽提试剂Trizol,裂解后抽提RNA。 2 RNA质量检测 a) 紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,以计算其浓度并评估RNA纯度。 b) 使用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳,检测RNA纯度及完整性。 3 cDNA模板制备 按照逆转录酶使用说明将样品RNA逆转录为cDNA。 4 实时定量PCR 根据说明将cDNA模板适当稀释后加入到实时定量PCR反应混合液中,然后在含有基因特异性引物的96孔板各孔中加入等量反应液,进行实时定量PCR反应。 5 数据处理:利用仪器配套软件计算各张PCR芯片中的每个基因的Ct值。zei后,采用△△Ct方法比较相应基因的表达量变化。 提供实验报告 :包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR芯片实验结果及相关图表。 更多相关技术资料,欢迎来电咨询!

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