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冰冻切片免疫组化
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| 参考报价： | 面议 | 型号： | 冰冻切片免疫组化 |
| 品牌： | 晶莱生物 | 产地： | 全国 |
| 关注度： | 暂无 | 信息完整度： |  |
| 样本： | 暂无样本 | 典型用户： | 暂无 |
免疫组化
应用免疫学基本原理，通过标记的特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分别进行组织和细胞原位检测，从而进行定位、定性及相对定量的研究。
实验意义
1. 免疫组织化学可应用于恶性肿瘤的病理诊断和科研工作。
2. 可与组织化学染色方法的形态学诊断相结合，提高疑难肿瘤的鉴别诊断的准确率，并为肿瘤进行进一步的病理分型。
3. 指导和提供临床治疗方案的选择。
实验步骤
1. 石蜡切片免疫组化：
①67℃烘箱烘片2小时，常规脱蜡至水，用pH 7.4的PBS冲洗三次，每次3 min；
②将切片置于沸腾的柠檬酸盐缓冲液中中档微波处理10 min，蒸馏水冲洗三次，PBS冲洗三次，每次3 min；
③3%H2O2室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗三次，每次3 min；
④5~10%正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10 min，吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗，37℃孵育1-2 h或者4℃孵育过夜；
⑤PBS冲洗三次，每次3 min；⑤滴加稀释至适当比例的带标记二抗，37℃孵育10~30 min，PBS冲洗三次，每次3 min；
⑥滴加适当比例稀释的辣根酶标记物工作液，37℃孵育10~30 min，PBS冲洗三次，每次3 min；
⑦显色剂显色，自来水充分冲洗，复染细胞核，酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
2. 冰冻切片免疫组化：
①新鲜组织立即在恒冷冰冻切片机内切片，厚度为5~6 μm；
②载玻片可不打底，裱片后立刻用电吹风吹干；
③染色前需用冷丙.酮4℃固定10~20 min；
④PBS洗2次，每次5 min；
⑤3%H2O2灭活内源性过氧化物酶20 min，需避光处理；
⑥后续血清封闭与抗体孵育步骤与石蜡切片相似，最后脱水透明封片进行观察。
结果展示
1. 石蜡切片免疫组化[1]
2. 冰冻切片免疫组化[2]
实验完成周期及交付标准
1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：蜡块、切片、染色图片、灰度值分析、柱状图、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
需确认的信息
1. 样本的种属？
2. 样本类型（固定的组织or蜡块or切片）
3. 检测的目的蛋白
4. 是否提供一抗，公司可代购
5. 阳性率或者半定量分析要求
6. 拍照要求
文献参考
[1] Jensen K , Rikke KrusenstjernaHafstr?m, Lohse J , et al. A novel quantitative immunohistochemistry method for precise protein measurements directly in formalin-fixed, paraffin-embedded specimens: analytical performance measuring HER2[J]. Modern Pathology An Official Journal of the United States & Canadian Academy of Pathology Inc, 2016, 30(2):180.
[2] Shi, ShanRong, Liu, et al. Evaluation of the Value of Frozen Tissue Section Used as "Golden Standard" for Immunohistochemistry[J]. American Journal of Clinical Pathology, 2008, 129(3):358.
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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途
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