染色质免疫共沉淀(Ch-IP)

一、技术原理

在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为

小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来，

以富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段，再通过多种下游检测技术（定量PCR、

基因芯片、测序等）来检测此富集片段的DNA序列。

二、实验步骤

1.样品准备与交联

细胞收集后，用37%的formaldehyde处理细胞，交联核酸与DNA结合蛋白；加入甘氨

酸终止。

2.细胞超声波破碎染色质

用超声方法随机把染色质破碎成200-1000bp的DNA片段；片段分成两部分，一份用于

免疫共沉淀，一份用于对照实验（InputDNA）。

3.免疫沉淀反应

使用目的蛋白质的特异性抗体与超声破碎的DNA片段进行免疫沉淀，形成DNA－蛋白

质－抗体复合物，利用proteinA/G琼脂糖磁珠富集抗体复合物。通过抗原和抗体反应形成

DNA－蛋白质－抗体复合体，然后沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段

4.DNA－蛋白质－抗体复合物的解交联和DNA纯化

将富集的DNA－蛋白质－抗体复合体解交联释放DNA片段，并进行纯化；InputDNA的

片断作不进行IP实验，但需要去交联并纯化

5.PCR鉴定

比较ChIPDNA,InputDNA及对照DNA信号强度，进行普通PCR或者相对精确的荧光定

量PCR扩增。

三、服务流程

1.甲醛处理细胞

2.超声破碎染色质

3.加入proteinA，沉淀抗体-靶蛋白-DNA复合物

4.解交联

5.PCR分析

四、服务说明

1.客户提供

新鲜的样品材料（组织或细胞）；ChIP级别的抗体（或由我公司代购）；如ChIP结束

后进行检测，input作为对照；如结束后进行普通PCR或者荧光定量PCR，则需要提供预测

靶基因结合位点的具体序列或目标靶基因的名称、种属、序列或GeneBankAcession）

2.公司提供

1）检测图；

2）完整的实验报告，包括对每个步骤的详细说明（具体操作方法、试剂或溶液浓度等），

以及相应的结果及分析。

3.实验周期

3-4周。

4.价格

9000元/次（含试剂盒）抗体由客户提供

五、质量承诺

提供清晰的图片、可靠的数据和分析结果。

染色质免疫共沉淀信息由北京吉田生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于染色质免疫共沉淀报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途