1、博恩生物技术服务优势（western blot篇）

近年来越来越多的文章科研造假被挖出，甚至涉及到NATURE等期刊，这其中最被诟病的就是western blot实验的造假，

大多文章撤稿都和western blot条带造假被发现有关。

因此越来越多的期刊要求作者在投稿时必须上传western blot条带结果未经剪裁的原图，甚至要求这些图片必须要有全

长marker标识相应蛋白的分子量。这个是不可逆转的大趋势，逐渐越来越多的期刊会加入到这一标准中来。现在做实验，

如果还不用这套标准，未来投稿将寸步难行。

如果您担心自己的科研前途毁于western blot的被造假，那选择博恩生物是一个选择。博恩生物除了为您提供拟合好的

高颜值大图外，还为您献上带有marker分子量的史上最严格的western blot原始图片，就算投nature也会再担心条带造

假的问题。全网您只能在博恩生物得到这样的支持。

那究竟什么叫做原图呢？期刊对于原图又有什么要求呢？

我们可以对比一下下图中1、2、3。图一是最普通的条带图，图2虽然是未裁剪的，但是并没有全长的marker标识分子量。

而博恩生物提供给客户的结果都是图3这种的标准结果图。目前大部分期刊也都是要求的图3这种图。但是这种做法

的缺点就是成本高，实验难度大。因此大部分实验室和公司都不会采用这样的方式。

2、博恩生物技术服务优势（示意图篇）

针对整体研究项目，博恩可为客户提供分子机制示意图制作服务。

3、博恩生物技术服务优势（方案审核篇）

博恩生物会对客户的方案进行合理性、可行性审核，避免实验设计环节出现严重问题。

4、博恩生物技术服务优势（完善的实验技术篇）

博恩生物可为客户提供包含动物实验、细胞实验、western blot、PCR、co-IP、ELISA、RIA、免疫组化、免疫荧光、病

理染色、ChIP、RNA pulldown、GST pulldown、EMSA、荧光素酶报告基因、siRNA/shRNA/慢病毒/腺病毒/腺相关

病毒转染、RIP、流式细胞术、激光共聚焦等多项实验技术服务。

Western blot、ELISA、免疫荧光、免疫组化的区别：

免疫组化或免疫荧光：检测蛋白表达，为定性实验为主，一般应用于组织居多，细胞应用较少，细胞可以使用免疫荧光实

验。主要用于考察蛋白的定位、共定位等情况。

推荐应用：临床组织、动物组织标本的关键性蛋白检测。

western blot：检测蛋白表达或转录后修饰（磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等），

与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用，也可以通过提取不同亚细胞组成用于检

测蛋白的定位情况。为半定量实验。

推荐应用：细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA：为定量实验，主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用

于蛋白转录后修饰的检测，不推荐通路相关蛋白的检测。

推荐应用：细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白，如细胞因子的检测。

PCR、western blot、ELISA的取舍？

PCR：检测的是mRNA，在一些特定情况下mRNA变化不等同于蛋白变化，如蛋白降解等。此外，某些mRNA是一定可以

翻译成蛋白的，如miRNA、lncRNA、circRNA等，这种情况只能选择PCR检测RNA。此外，一些通路蛋白，如p65、

β-catenin等，有较多转录后修饰方式，如磷酸化，这种发生于蛋白层面的变化PCR也是无能为力的。

推荐应用：临床组织、动物组织标本的mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA检测。

western blot：检测蛋白表达或转录后修饰（磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等），

与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用，也可以通过提取不同亚细胞组成用于

检测蛋白的定位情况。为半定量实验。

推荐应用：细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA：为定量实验，主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用

于蛋白转录后修饰的检测，不推荐通路相关蛋白的检测。

推荐应用：细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白，如细胞因子的检测。

co-IP、GST pulldown、ChIP、RIP、RNA pull-down、EMSA、荧光素酶报告基因的逻辑关系比较

ChIP、EMSA：蛋白与DNA结合情况。

RIP、RNA pull-down：蛋白与RNA结合情况。

荧光素酶报告基因：启动子激活情况。

co-IP、GST pulldown：蛋白之间结合情况、蛋白特殊转录后修饰研究，如泛素化、苏素化等。

ChIP、RIP、RNA pull-down、EMSA、荧光素酶报告基因的比较

ChIP：通过与染色质片段共沉淀和PCR技术，在体内检测与特异蛋白质结合的DNA。将处于适当生长时期的活细胞用甲醛

交联后将细胞裂解, 染色体分离并打碎为一定大小的片段200bp-1000bp;然后用特异性抗体免疫沉淀目标蛋白与 DNA交联

的复合物, 对特定靶蛋白与DNA进行富集。采用低pH值条件反交联, DNA与蛋白质之间的 Schiff键水解, 释放DNA。通过

对目标片段的纯化与检测,获得DNA与蛋白质相互作用的序列信息。 

研究目的：蛋白与DNA结合情况。

RIP：RIP技术（RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RNA结合蛋白免疫沉淀），是研究细胞内RNA与蛋白结合

情况的技术。运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的

RNA进行分析；即用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白，防止非特异性的RNA的结合，免

疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来，结合的RNA序列通过microarray （RIP-Chip），定量RT-PCR或高

通量测序（RIP-Seq）方法来鉴定。是了解转录后调控网络动态过程的有力工具，能帮助我们发现miRNA的调节靶点。 

研究目的：蛋白与RNA结合情况。

RNA pull-down：使用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白质复合物。该复合物

可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过western blot实验检测特定的RNA

结合蛋白是否与RNA相互作用。

研究目的：蛋白与RNA结合情况。

EMSA：凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的

DNA结合序列相互作用的技术，可用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用、DNA定性和定量分析。生物

素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链。

研究目的：蛋白与DNA结合情况。

荧光素酶报告基因：荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中，将不同类型的细胞（干细胞、T细胞等）

标记上（即表达）荧光素酶，就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活体观察而不会伤害到动物本身。在荧光素

酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到

。这就使得对包括感染在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。

研究目的：启动子激活情况。

5、博恩生物技术服务优势（精美的报告结果图篇）

博恩生物为客户提供拟合好的精美实验结果图片，可以直接用于文章发表。

6、博恩生物技术服务优势（完善的动物模型篇）

博恩生物可为客户提供种类繁多的动物模型制备服务。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途