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测试物对肝脏药物代谢酶CYP450诱导作用的体外研究(mRNA表达量,三个单供体的人原代肝细胞,6个浓度)

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参考报价: 面议 型号: 测试物对肝脏药物代谢酶CYP450诱导作用的体外研究(mRNA表达量,三个单供体的人原代肝细胞,6个浓度)
品牌: 瑞德肝脏 产地: 上海
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试验6A:测试物对肝脏药物代谢酶CYP450诱导作用的体外研究(mRNA表达量,三个单供体的人原代肝细胞,6个浓度)
目的:从mRNA表达量评价测试物是否对肝脏药物代谢CYP450亚酶具有潜在的诱导作用。 
测试物数目1
测试系统:原代人肝细胞,三个供体3
测试酶系(mRNA):
  • CYP1A2: NM_000761.3 human
  • CYP2B6: NM_000767.4human
  • CYP3A4: NM_017460.5human
  • β-Actin: NM_001101.3human
3
测试浓度:六个待测物浓度水平(根据有效剂量下的血药浓度、预测肝浓度、细胞毒性和溶解度等信息设定)6
样本量:每个浓度三个重复样本(包括对照组)3
孵育条件:
  • 所用细胞密度:0.7 × 106 cell/mL
  • 测试物与细胞孵育时间:2-3
  • 温度:37.0 oC5% CO2
 
对照组
  • 空白对照:含相同含量(v/v)有机溶剂的培养基与贴壁人肝细胞孵育。
  • 阳性对照:CYP1A2诱导剂奥美拉唑,CYP2B6诱导剂phenobarbital,或CYP3A4诱导剂利福平与贴壁人肝细胞细胞孵育2 - 3
  • 阴性对照:罗红霉素(CYP450非诱导剂)与贴壁人肝细胞细胞孵育2-3天。
  • (同时评价肝细胞毒性)
 
试验参数:
  • 相对于空白对照组的mRNA表达量倍数(Fold change
  • 相对于阳性对照组的mRNA增加比例(Percent positive control
  • 如有浓度依赖性诱导作用,则计算体外最大诱导效应(Emax)和体外半数最大诱导效应的浓度(EC50
 
试验周期:30个工作日 


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