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动物细胞传代培养
| 参考报价： | 面议 | 型号： | 动物细胞传代培养 |
| 品牌： | 伊莱博 | 产地： | 上海 |
| 关注度： | 暂无 | 信息完整度： |  |
| 样本： | 暂无样本 | 典型用户： | 暂无 |
贴壁细胞的传代
1 入无菌室之前首先要用肥皂或洗手液洗手，用灭溶液擦拭双手消毒。
2 打开超净工作台的紫外消毒灯（紫外消毒20-30min）。从CO2培养箱取出培养细胞，倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置于37℃下预热。
3 关闭已照射超净工作台20min左右的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。
4 点燃酒精灯，用75%乙醇擦拭双手消毒，并擦净台面。
5 将培养用液瓶身用75%酒精檫拭消毒后放入操作台内。
6 从培养箱中取出细胞培养瓶，经75%酒精喷洒消毒后立放于操作台内。
7 倒掉细胞旧培养液，4ml PBS洗涤两遍，解除残留血清对胰蛋白酶的抑制作用。
8 向培养瓶（25cm2）加入1ml的胰酶消化液，小瓶用量酬减。
9 盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察，立刻放入培养箱中消化，一般1-2min。
10 当细胞突起收回即将变圆时立即取出。
11 加入5ml含血清的新鲜培养基，反复吹打贴壁细胞的培养瓶底部使消化好的细胞脱壁并分散，移入10ml离心管中，800 r/min，2min。
12 加入1-2ml培养基制成细胞悬液并计数。根据计数结果，按每个小方瓶2×105接种细胞传代培养。
13 盖上瓶盖，适度柠紧后再稍旋回，给出空气通道，以利于CO2气体的进出，将培养瓶放回培养箱。
1 入无菌室之前首先要用肥皂或洗手液洗手，用灭溶液擦拭双手消毒。
2 打开超净工作台的紫外消毒灯（紫外消毒20-30min）。从CO2培养箱取出培养细胞，倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置于37℃下预热。
3 关闭已照射超净工作台20min左右的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。
4 点燃酒精灯，用75%乙醇擦拭双手消毒，并擦净台面。
5 将培养用液瓶身用75%酒精檫拭消毒后放入操作台内。
6 从培养箱中取出细胞培养瓶，经75%酒精喷洒消毒后立放于操作台内。
7 倒掉细胞旧培养液，4ml PBS洗涤两遍，解除残留血清对胰蛋白酶的抑制作用。
8 向培养瓶（25cm2）加入1ml的胰酶消化液，小瓶用量酬减。
9 盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察，立刻放入培养箱中消化，一般1-2min。
10 当细胞突起收回即将变圆时立即取出。
11 加入5ml含血清的新鲜培养基，反复吹打贴壁细胞的培养瓶底部使消化好的细胞脱壁并分散，移入10ml离心管中，800 r/min，2min。
12 加入1-2ml培养基制成细胞悬液并计数。根据计数结果，按每个小方瓶2×105接种细胞传代培养。
13 盖上瓶盖，适度柠紧后再稍旋回，给出空气通道，以利于CO2气体的进出，将培养瓶放回培养箱。
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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途
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